H2DCFDA (DCFH-DA)

N.º de catálogoS9687 Lote:S968702

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Datos técnicos

Fórmula

C₂₄H₁₆Cl₂O₇

Peso molecular

487.29

Número CAS

4091-99-0

Solubilidad (25°C)*

In vitro

DMSO

97 mg/mL (199.06 mM)

Ethanol

15 mg/mL (30.78 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	4.850mg/ml (9.95mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 97 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.800mg/ml (1.64mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 16 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción

H2DCFDA (DCFH-DA) es una sonda permeable a las células utilizada para detectar la producción intracelular de especies reactivas de oxígeno (ROS). Se desesterifica intracelularmente y se convierte en 2′,7′-diclorofluoresceína altamente fluorescente tras la oxidación. Este compuesto se utiliza en la cuantificación sensible y rápida de especies reactivas al oxígeno en respuesta al metabolismo oxidativo; ensayo en microplacas para detectar productos oxidativos en células fagocíticas y ensayo cuantitativo de diferenciación mieloide en multipocillos (Ex/Em=488/525 nm).

Objetivos

ROS

In vitro

1. H2DCFDA (DCFH-DA) se disuelve en DMSO para obtener soluciones madre de 10 mM y se diluye aún más antes de su uso.
2. Las células se incuban con 5 μM de este compuesto en PBS en la oscuridad durante 30 min a 37°C, luego se recolectan con una solución de tripsina-EDTA al 0,05%, se suspenden en un medio fresco y se analizan inmediatamente con un citómetro de flujo.
3. Además, si se indica, utilice una modificación de la fluoresceína DCFDA insensible a ROS como control positivo. El procedimiento de tinción es el mismo que para el H2DCFDA.
Emisión (Em)=517 Excitación (Ex)=492 517

Protocolo (de referencia)

Ensayo celular:^{^[2]}	Líneas celulares hCECs Concentraciones 10 μM Tiempo de incubación 30 min Método Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye H2DCFDA (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without this compound are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

Ensayo celular:^{^[2]}

Líneas celulares
hCECs
Concentraciones
10 μM
Tiempo de incubación
30 min
Método
Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye H2DCFDA (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without this compound are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30372737/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/

Sellecks H2DCFDA (DCFH-DA) Ha sido citado por 9 Publicaciones

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Fusobacterium nucleatum-triggered neutrophil extracellular traps facilitate colorectal carcinoma progression [ J Exp Clin Cancer Res, 2023, 42(1):236]	PubMed: 37684625
Erianin inhibits the growth and metastasis through autophagy-dependent ferroptosis in KRASG13D colorectal cancer [ Free Radic Biol Med, 2023, 204:301-312]	PubMed: 37217090
FLRT2 suppresses bladder cancer progression through inducing ferroptosis [ J Cell Mol Med, 2023, 10.1111/jcmm.17855]	PubMed: 37480224
Reactive sulfur species disaggregate the SQSTM1/p62-based aggresome-like induced structures via the HSP70 induction and prevent parthanatos [ J Biol Chem, 2023, 299(6):104710]	PubMed: 37060999
[A Novel Chinese Medicine Formula Inhibits Non-small Cell Lung Cancer by Triggering Oxidative Stress Dependent on Pentose Phosphate Pathway] [ Zhongguo Fei Ai Za Zhi, 2023, 10.3779/j.issn.1009-3419.2023.101.27]	PubMed: 37985150
Elevated neutrophil extracellular traps by HBV-mediated S100A9-TLR4/RAGE-ROS cascade facilitate the growth and metastasis of hepatocellular carcinoma [ Cancer Commun (Lond), 2022, 10.1002/cac2.12388]	PubMed: 36346061
S100A8-Mediated NLRP3 Inflammasome-Dependent Pyroptosis in Macrophages Facilitates Liver Fibrosis Progression [ Cells, 2022, 11(22)3579]	PubMed: 36429008
The potential efficacy and mechanism of bendamustine in entra-nodal NK/T cell lymphoma [ Hematol Oncol, 2022, 10.1002/hon.3007]	PubMed: 35439335

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