GW4064

GW 4064 es un agonista completo con valores de EC50 de 80 y 90 nM, respectivamente, en células CV-1 transfectadas con vectores de expresión de FXR de ratón y humano y un gen reportero establecido. No hay actividad de este compuesto en otros receptores nucleares, incluido el receptor de ácido retinoico, a concentraciones de hasta 1 μM. Por lo tanto, este químico es un agonista de FXR potente y selectivo no esteroideo. [2]

El análisis farmacocinético en ratas muestra que el GW 4064 posee una biodisponibilidad oral del 10 % con un t_1/2 = 3,5 h. Se administra este compuesto a ratas Fisher por sonda oral. Después de 7 días, se observa una disminución dosis-dependiente de los triglicéridos séricos en las ratas que reciben este químico, con una ED50 = 20 mg/kg. [2]

• Ensayo de Transfección Transitoria de FXR

  Las células CV1 se mantienen en medio DMEM con alta glucosa. Las células CV1 se cosechan 72 horas antes de la transfección y se siembran en medio DMEM-F12 sin rojo fenol que contiene 5% de suero fetal bovino tratado con carbón/dextrano y 2 mM de glutamina. El día de la transfección, las células CV1 se cosechan en medio DMEM-F12 sin rojo fenol que contiene 5% de suero fetal bovino tratado con carbón/dextrano y 2 mM de glutamina, se cuentan y se siembran en un matraz T-175 cm² a una densidad de 14 millones de células por matraz antes de añadir la mezcla de transfección. La mezcla de transfección FuGENE® 6 que contiene 0,55 μg del plásmido de expresión pFA-CMV-GAL4-FXR LBD humano, 10,92 μg del plásmido reportero (UAS)-tk-Luciferase, 20,75 μg de pBluescript II KS+ y 3,82 μg de un constructo de coactivador de receptor esteroideo humano (SRC-1) se incuba y luego se añade a las células CV1 para una incubación nocturna en el incubador. Las células CV1 transfectadas se cosechan en medio DMEM-F12 sin rojo fenol que contiene 5% de suero fetal bovino tratado con carbón/dextrano y 2 mM de glutamina. Las células transfectadas se añaden a una concentración de 3750 células/pocillo a placas de 384 pocillos que contienen ligandos. La expresión de luciferasa se mide utilizando el sistema de ensayo Steady-Glo™Luciferase 24 horas después de la incubación con el ligando. Este compuesto se utiliza como control y los datos se normalizan a este compuesto como % de control.

• Líneas celulares

  HepG2 cells

• Concentraciones

  10 µM

• Tiempo de incubación

  2 h

• Método

  Cells were treated with indicated concentration of GW4064 for 2 h.

• Modelos animales

  Fisher rats

• Dosificaciones

  0-100 mg/kg

• Administración

  Orally, b.i.d.