Fludarabine

Fludarabine inhibe eficazmente la proliferación de células RPMI 8226 con una IC50 de 1,54 μg/mL. La IC50 de este compuesto contra las células MM.1S y MM.1R es de 13,48 μg/mL y 33,79 μg/mL, respectivamente. Por el contrario, las células U266 son resistentes a este químico con una IC50 de 222,2 μg/mL. El tratamiento con este compuesto resulta en un aumento del número de células en la fase G1 del ciclo celular, acompañado de una reducción concomitante de células en la fase S del ciclo celular de manera dependiente del tiempo. Induce un bloqueo del ciclo celular y desencadena la apoptosis en las células de mieloma múltiple. Desencadena la escisión dependiente del tiempo de caspasa-8, -9, y -3, -7, seguida de la escisión de PARP. Aumenta la expresión de Bax de manera dependiente del tiempo, mientras que la expresión de Bak no cambia. Después de la exposición a este químico durante 12 horas, las células RPMI 8226 muestran una pérdida de potencial de membrana con el 61,05% de las células expresando baja fluorescencia de rodamina 123 en comparación con el 8,62% de las células en el control no tratado. [1] Para mejorar la solubilidad, se formula como monofosfato (F-ara-AMP, fudarabina), que se desfosforila instantánea y cuantitativamente al nucleósido original tras la infusión intravenosa. Dentro de las células se produce una refosforilación que conduce al trifosfato de arabinósido de fluoroadenina (F-ara-ATP), el principal metabolito citotóxico de F-ara-A. [2] También puede inducir la estimulación proinflamatoria de células monocíticas, según se evaluó por el aumento de la expresión de ICAM-1 y la liberación de IL-8. [3] Este compuesto no afecta el crecimiento de las líneas celulares de cáncer de ovario, mientras que induce una inhibición marcada y dosis-dependiente de la proliferación en las líneas celulares de melanoma. [4] Es un inhibidor de STAT1 que reduce específicamente STAT1 sin afectar a otros miembros de la familia STAT[5]. Además de la acumulación citoplasmática, el cisplatino en dosis bajas repetidas (RLDC) induce la expresión de HMGB1, que está marcadamente suprimida por el silenciamiento de STAT1. Consistentemente, este químico suprime la expresión de HMGB1 durante el tratamiento con RLDC de manera dosis-dependiente en células tubulares renales tratadas con RLDC[5].

Los tumores tratados con PBS crecen rápidamente hasta aproximadamente 10 veces su volumen inicial en 25 días, mientras que los tumores con Fludarabine a 40 mg/kg aumentan menos de 5 veces. Se demuestra un efecto antitumoral significativo de 40 mg/kg de este compuesto en el crecimiento tumoral de RPMI8226. Los tumores RPMI8226 tratados con 40 mg/kg de este químico en el día 10 aumentan los núcleos apoptóticos. Este compuesto es eficaz para suprimir los xenoinjertos de mieloma RPMI8226 en ratones SCID. [1]

• Líneas celulares

  Dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines

• Concentraciones

  2 μg/mL

• Tiempo de incubación

  24 hours

• Método

  After treated with Fludarabine or control, dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines (5 × 10⁵ cells) are washed twice in phosphate-buffered saline (PBS) and fixed with 70% ice-cold ethanol, then centrifuged and suspended in PBS containing 100 μg/mL RNase A. After incubated for 30 minutes at 37 ºC, samples are resuspended in 25 μg/mL propidium iodide. Flow cytometry is performed on a FACSCalibur automated system. Apoptosis is determined by Annexin V-FITC apoptosis detection kit, according to the manufacturer's instructions. For TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling) assay, cells are analyzed by flow cytometry using the in situ cell death detection kit.

• Modelos animales

  Severe combined immunodeficient (SCID) mice bearing RPMI 8226 cells

• Dosificaciones

  40 mg/kg

• Administración

  Administered via i.p.