Flavopiridol (Alvocidib) HCl

N.º de catálogoS2679 Lote:S267904

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Datos técnicos

Fórmula

C21H20ClNO5.HCl
Peso molecular 438.3 Número CAS 131740-09-5
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 88 mg/mL (200.77 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción Flavopiridol (Alvocidib) HCl compite con el ATP para inhibir las CDKs, incluyendo CDK1, CDK2, CDK4 y CDK6 con una IC50 de ~ 40 nM en ensayos libres de células. Es 7,5 veces más selectivo para CDK1/2/4/6 que para CDK7. Inicialmente se encuentra que Flavopiridol inhibe EGFR y PKA. Flavopiridol HCl induce Autophagy y estrés del RE. Flavopiridol HCl bloquea la replicación del HIV-1. Fase 1/2.
Objetivos
CDK1
(Cell-free assay)		 CDK2
(Cell-free assay)		 CDK4
(Cell-free assay)		 CDK6
(Cell-free assay)		 CDK7
(Cell-free assay)
40 nM 40 nM 40 nM 40 nM 300 nM
In vitro Inicialmente, se encuentra que Flavopiridol inhibe el receptor del factor de crecimiento epidérmico y la proteína quinasa A (IC50 = 21 y 122 μM). Posteriormente, se demuestra que Flavopiridol inhibe la proliferación Cell Cycle, a concentraciones más fisiológicamente relevantes (IC50 = 66 nM) cuando se prueba Flavopiridol en el panel de 60 líneas Cell Cycle tumorales humanas del Programa de Terapéutica del Desarrollo del Instituto Nacional del Cáncer. Flavopiridol induce la detención en G1 con inhibición de CDK2 y CDK4 en Cell Cycle de carcinoma de mama humano de manera dependiente del tiempo y la concentración. El tratamiento a corto plazo con Flavopiridol (aproximadamente 12 horas) induce apoptosis en líneas Cell Cycle hematopoyéticas, incluyendo SUDHL4, SUDHL6 (líneas Cell Cycle de linfocitos B), Jurkat y MOLT4 (líneas Cell Cycle de linfocitos T), y HL60 (mieloide). En el ensayo clonogénico, Flavopiridol funciona como un compuesto citotóxico altamente potente con una IC70 media de 8 ng/mL en 23 modelos de tumores humanos. Un estudio reciente muestra que el tratamiento con Flavopiridol induce una fosforilación sustancial de AKT-Ser473 en la línea Cell Cycle de glioblastoma humano T98G.
In vivo A la dosis máxima tolerada de 10 mg/kg/día administrada p.o. en los días 1-4 y 7-11, Flavopiridol provoca regresión tumoral en PRXF1337 y estasis tumoral durante 4 semanas en PRXF1369. Después del tratamiento con 7,5 mg/kg de Flavopiridol en bolo intravenoso (IV) o intraperitoneal durante 5 días consecutivos, 11 de 12 xenoinjertos subcutáneos (s.c.) humanos de HL-60 en estadio avanzado experimentan regresiones completas, y los animales permanecen libres de enfermedad varios meses después de un ciclo de tratamiento con Flavopiridol. Los linfomas s.c. SUDHL-4 tratados con flavopiridol a 7,5 mg/kg en bolo IV durante 5 días experimentan una regresión mayor (dos de ocho ratones) o completa (cuatro de ocho ratones), con dos animales que permanecen libres de enfermedad durante más de 60 días. El retraso general del crecimiento es del 73,2%. La administración diaria IV o IP de flavopiridol da como resultado niveles plasmáticos máximos de aproximadamente 7 µM, seguidos de un descenso progresivo a aproximadamente 100 nM en 8 horas.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:[1]
  • Reacciones de Quinasas de CDKs Recombinantes

    Las actividades de las CDKs se determinan en placas de microtitulación de la siguiente manera. Cuarenta μg de Gst-Rb se mezclan con diferentes cantidades de Flavopiridol y ATP no marcado. Las reacciones se inician luego con la adición de un corte de sulfato de amonio de la fracción S100 obtenida de Cell Cycle de insectos que expresan CDKs humanas recombinantes. Las condiciones finales de reacción son 10 mM MgCl2, 50 mM Tris-HCl (pH 7,5) y 1 mM DTT. La concentración final de ATP se ajusta en consecuencia. Se utiliza ATP radiomarcado como donante de fosforilo. La reacción se lleva a cabo durante 2,5 minutos a 30 °C después de la adición de la enzima y luego se termina con la adición de EDTA. El Gst-Rb se captura luego con glutatión-Sepharose y la radiactividad incorporada se determina mediante recuento por centelleo líquido.
Ensayo celular:[2]
  • Líneas celulares

    SUDHL4, SUDHL6, Jurkat, MOLT4, and HL60

  • Concentraciones

    0, 100 500, 5000 nM

  • Tiempo de incubación

    14 hours

  • Método

    Cells grown at a density of 1 × 106 cells/mL are exposed to Flavopiridol for different concentrations and time periods. DNA is extracted. Briefly, cells are washed once with cold phosphate-buffered saline (PBS) and lysed with 3 mL lysis buffer (5 mM Tris-HCL [pH 7.5]; 20 mM EDTA; 0.5% Triton X-100) for 15 minutes at 4 °C. The chromatin of the cell lysates is isolated by centrifugation (20 minutes at 26,000g, 4 °C). The supernatants containing small DNA fragments are extracted sequentially with phenol, phenol:chloroform (1:1), and chloroform. Nucleic acids are precipitated in 0.5 M NaCl, 90% ethanol at -20 °C overnight. RNA is then digested by bovine RNAaseA (60 μg/mL). After sequential reextraction and reprecipitation, DNA is dissolved in 10 mM Tris-HCL (pH 7.5), 1 mM EDTA, 0.5% sodium dodecyl sulfate (SDS) before electrophoresis on 1.6% agarose gel.

Estudio en animales:[4] [6]
  • Modelos animales

    Human prostate cancer xenografts, PRXFI337 and PRXFI369, grown s.c. in nude mice [4] Human promyelocytic leukemia HL-60, human B-cell follicular lymphoma SUDHL-4, and acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)-r

  • Dosificaciones

    10 mg/kg/d [4]; 7.5 mg/kg/d [6]

  • Administración

    p.o.[4]; i.p. or i.v. [6]

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12165651/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8674031/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427698/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9815683/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22391209/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9516149/

Validación de productos por parte del cliente

<p>Comparative efficacy of anticancer therapies (Flavopiridol, vincristine, daunorubicin, et al.) in NMC vs non-NMC cell lines. Mean IC50 (± s.e.m.) of the indicated agents in three NMC (PER-403, PER-624, and PER-704) and two non-NMC cell lines (PER-535 and SAOS2), ***P<0.001, unpaired t-test, corrected for multiple testing.</p>

Datos de [ Br J Cancer , 2014 , 110(5), 1189-98 ]

RPMI-8226 cells were treated with the indicated CDK inhibitors for 8 hours. Western blots are shown. The following drug concentrations were used: SLM6 at 250 nM, flavopiridol at 250 nM, roscovitine at 5 uM, purvalanol A at 10 uM, and alsterpaullone at 5 uM.

Datos de [ Mol Cancer Ther , 2012 , 11(11), 2321-2330 ]

<p>(C) In vivo treatment of Tg:Pomc-Pttg;Pomc-eGFP embryos with small-molecule CDK inhibitors (50μM) or 0.2% DMSO as control from 18 to 40 hpf. One hundred to one hundred fifty embryos were treated with each compound. Representative images of live embryos are shown with gross morphology (Right) and pituitary Pomc-GFP–positive cells at higher magnification (Left) at 40 hpf. Embryos exposed to flavopiridol developed early developmental defect before pituitary POMC cell ontogeny occurs. (D) Relative expression of pituitary Pomc-eGFP fluorescence analyzed using Volocity 5.2 software (Improvision; mean ± SE of relative expression, n = 7). (E) R-roscovitine specifically suppresses expansion of pituitary POMC cells overexpressing zPttg from 18 to 48 hpf. Double transgenic Tg:Pomc-Pttg;Prl-RFP embryos were generated by breeding Tg:Pomc-Pttg fish with a previously generated PRL-RFP transgenic line, in which RFP was targeted to pituitary lactotrophs by a zebrafish Prolactin promoter (34). Representative fluorescent microscopy of pituitary POMC-eGFP (a and b) and PRL-RFP (c and d) expression in live Tg:Pomc-Pttg; Pomc-eGFP and Tg:Pomc-Pttg;Prl-RFP embryos treated with 0.2% DMSO (a and c) or 50 μM R-roscovitine (b and d). (F) Relative expression of pituitary POMC-eGFP or PRL-RFP fluorescence were analyzed (mean ± SE of relative expression; n = 10). Results represent one of three similar experiments;*P < 0.02 and **P < 0.000005. (Scale bar, 50 μm.)</p><div><div> </div></div><p> </p>

Datos de [ PNAS , 2011 , 108, 8417 ]

Sellecks Flavopiridol (Alvocidib) HCl Ha sido citado por 61 Publicaciones

Monoallelically expressed noncoding RNAs form nucleolar territories on NOR-containing chromosomes and regulate rRNA expression [ Elife, 2024, 13e80684] PubMed: 38240312
From co-delivery to synergistic anti-inflammatory effect: Studies on chitosan-stabilized Janus emulsions having chloroquine phosphate and flavopiridol in Complete Freund's Adjuvant induced arthritis rat model [ Int J Biol Macromol, 2023, 258(Pt 1):128776] PubMed: 38114014
Claspin is Required for Growth Recovery from Serum Starvation through Regulating the PI3K-PDK1-mTOR Pathway in Mammalian Cells [ Mol Cell Biol, 2023, 43(1):1-21] PubMed: 36720467
Lamin A/C phosphorylation at serine 22 is a conserved heat shock response to regulate nuclear adaptation during stress [ J Cell Sci, 2023, 136(4)jcs259788] PubMed: 36695453
Brd4-dependent CDK9 expression induction upon sustained pharmacological inhibition of P-TEFb kinase activity [ Biochem Biophys Res Commun, 2023, 671:75-79] PubMed: 37295357
The super elongation complex drives transcriptional addiction in MYCN-amplified neuroblastoma [ Sci Adv, 2023, 9(13):eadf0005] PubMed: 36989355
Single-cell T cell receptor sequencing of paired human atherosclerotic plaques and blood reveals autoimmune-like features of expanded effector T cells [ Nat Cardiovasc Res, 2023, 2(2):112-125] PubMed: 38665903
Nuclear oligo hashing improves differential analysis of single-cell RNA-seq [ Nat Commun, 2022, 13(1):2666] PubMed: 35562344
p300/CBP sustains Polycomb silencing by non-enzymatic functions [ Mol Cell, 2022, 82(19):3580-3597.e9] PubMed: 36206738
Discovery of a large-scale, cell-state-responsive allosteric switch in the 7SK RNA using DANCE-MaP [ Mol Cell, 2022, S1097-2765(22)00114-9] PubMed: 35320755

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