Etoposide

Etoposide inhibe la síntesis de ADN formando un complejo con la topoisomerase II y el ADN, lo que induce roturas en el ADN de doble cadena y previene la reparación mediante la unión de la topoisomerase II. Las roturas acumuladas en el ADN impiden la entrada en la fase mitótica de la división celular y conducen a la muerte celular. Este compuesto actúa principalmente en las fases G2 y S del ciclo celular. [1] Inhibe el crecimiento de la línea celular de angiosarcoma murino (ISOS-1) en un período de 5 días con una IC50 de 0,25 μg/mL. El crecimiento celular de las células endoteliales microvasculares murinas normales (mECs) es menos sensible a este químico con una IC50 de 10 μg/mL). [2] Este agente tratado durante 6 horas inhibe las colonias de la variante tetraploide de la línea linfoblástica leucémica humana CCRF-CEM con una IC50 de 0,6 μM. [3] Tratado durante 2 horas inhibe el crecimiento de las líneas celulares de cáncer de páncreas humano Y1, Y3, Y5, Y19, YM. YS y YT con IC50 de 300 μg/mL, 300 μg/mL, 300 μg/mL, 91 μg/mL, 0,68 μg/mL, 300 μg/mL, 300 μg/mL y 260 μg/mL, respectivamente. [4] Este compuesto expuesto durante 1 hora inhibe el crecimiento de las líneas celulares de glioma humano CL5, G142, G152, G111 y G5 con IC50 de 8, 9, 9,8, 10 y 15,8 μg/mL respectivamente durante 12 días. Bajo la misma condición, el valor de IC90 se alcanza en las líneas celulares CL5, G152, G142 y G111 a 26, 27, 32 y 33 μg/mL. Su inhibición de la topoisomerase II es homogénea para cada célula. Las tasas de inhibición promedio son 15%, 21,8%, 31,8%, 41,5% y 49,5% para 1, 2, 4, 8 y 16 μg de este agente, respectivamente. [5]

Etoposide administrado como agente único ha demostrado ser ineficaz en el crecimiento de muchos xenoinjertos, como el hepatoblastoma heterotrasplantado NMHB1 y NMHB 2, [6] el xenoinjerto de neuroblastoma humano, [7] y el xenoinjerto de cáncer gastrointestinal humano, [8] mientras que la dosis de 10 mg/kg i.p. de este compuesto inhibe los tumores de células de angiosarcoma murino ISOS-1 en el 36% de los controles. [2] Este químico induce inmunidad tumoral en el cáncer de pulmón de Lewis. Una única administración de 50 mg/kg de este agente i.p. induce una supervivencia del 60% de los ratones C57B1/6 inyectados con células de cáncer de pulmón de Lewis (3LL) durante 60 días. Alrededor del 40% de estos ratones supervivientes rechazan un desafío posterior con 3LL, mientras que ninguno de los ratones de control sobrevive más allá de 30 días. Las células 3LL que han sobrevivido a una concentración letal del 90% de este compuesto in vitro matan al 75% de los ratones receptores, pero el 60% de los ratones supervivientes rechazan el desafío con 3LL. Los esplenocitos cosechados de ratones que rechazan el tumor protegen a los ratones ingenuos inyectados con 3LL. [9]

• Ensayo de actividad de Topoisomerase II

  Se preparan extractos nucleares y se aíslan los núcleos. La actividad de la topoisomerase II se calcula a partir del porcentaje de decatenación obtenido. Se utiliza ADN kinoplasto tritiado (KDNA 0,22 μg) como sustrato. Etoposide y la topoisomerase II se incuban durante 30 min a 37 ℃ y se detienen con 1% de dodecilsulfato de sodio (SDS) y proteinasa K (100 μg/mL). Se obtienen los porcentajes de decatenación e inhibición de la topoisomerase II por este compuesto.

• Líneas celulares

  Human glioma cell lines CL5

• Concentraciones

  80 μg/mL

• Tiempo de incubación

  1 hour

• Método

  After the Etoposide treatment, cells are removed from the dish with phosphate-buffered saline (PBS) containing 0.03% trypsin and 0.27 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and are diluted into culture dishes in appropriate numbers to yield between 20 and 200 colonies. After 12 days, cultures are fixed with methanol-acetic acid, stained with crystal violet, and scored for colonies containing more than 50 cells. The standard errors are typically less than 15% of the mean value unless otherwise stated.

• Modelos animales

  Murine angiosarcoma xenografts ISOS-1

• Dosificaciones

  10 mg/kg

• Administración

  i.p. every day for 5 days from day 7