Hoja de datos

Descripción biológica

Especificidad	Endothelial Cell Antibody [K23P8] reconoce los niveles endógenos de la proteína Endothelial Cell total.
Antecedentes	Las células endoteliales forman una monocapa única y delgada que recubre las superficies interiores de los vasos sanguíneos y linfáticos, sirviendo como una barrera crítica entre los fluidos circulantes y los tejidos circundantes. Están conectadas por uniones estrechas y ancladas a una membrana basal, con proteínas de superficie especializadas como VE-cadherina y PECAM-1 que mantienen la integridad vascular y median las interacciones de las células inmunitarias. Regulan el tono vascular liberando vasodilatadores como el óxido nítrico y vasoconstrictores como la endotelina, mantienen la hemostasia equilibrando factores pro y anticoagulantes, y controlan la filtración de fluidos a través de las paredes de los vasos. Desempeñan papeles esenciales en la Angiogenesis al proliferar y migrar para formar nuevos capilares, que son importantes para la curación de heridas, la reproducción y el crecimiento tumoral. Las células endoteliales también modulan la vigilancia inmunitaria a través de la expresión de selectinas e integrinas, facilitando el rodamiento, la adhesión y la transmigración de leucocitos durante la inflamación. La disfunción de las células endoteliales contribuye a enfermedades como la aterosclerosis, la hipertensión, las complicaciones vasculares relacionadas con la diabetes y la inflamación crónica. En los tumores, las células endoteliales anormales forman vasos irregulares y frágiles que carecen de músculo liso y cobertura de pericitos, lo que promueve la progresión y metástasis del cáncer. La disfunción endotelial cambia su fenotipo de anticoagulante y antiinflamatorio a protrombótico y proinflamatorio, impulsando la progresión de la enfermedad vascular.

Especificidad

Endothelial Cell Antibody [K23P8] reconoce los niveles endógenos de la proteína Endothelial Cell total.

Antecedentes

Las células endoteliales forman una monocapa única y delgada que recubre las superficies interiores de los vasos sanguíneos y linfáticos, sirviendo como una barrera crítica entre los fluidos circulantes y los tejidos circundantes. Están conectadas por uniones estrechas y ancladas a una membrana basal, con proteínas de superficie especializadas como VE-cadherina y PECAM-1 que mantienen la integridad vascular y median las interacciones de las células inmunitarias. Regulan el tono vascular liberando vasodilatadores como el óxido nítrico y vasoconstrictores como la endotelina, mantienen la hemostasia equilibrando factores pro y anticoagulantes, y controlan la filtración de fluidos a través de las paredes de los vasos. Desempeñan papeles esenciales en la Angiogenesis al proliferar y migrar para formar nuevos capilares, que son importantes para la curación de heridas, la reproducción y el crecimiento tumoral. Las células endoteliales también modulan la vigilancia inmunitaria a través de la expresión de selectinas e integrinas, facilitando el rodamiento, la adhesión y la transmigración de leucocitos durante la inflamación. La disfunción de las células endoteliales contribuye a enfermedades como la aterosclerosis, la hipertensión, las complicaciones vasculares relacionadas con la diabetes y la inflamación crónica. En los tumores, las células endoteliales anormales forman vasos irregulares y frágiles que carecen de músculo liso y cobertura de pericitos, lo que promueve la progresión y metástasis del cáncer. La disfunción endotelial cambia su fenotipo de anticoagulante y antiinflamatorio a protrombótico y proinflamatorio, impulsando la progresión de la enfermedad vascular.

Información de uso

Aplicación

IHC

Dilución

IHC

1:100

Reactividad

Rat

Fuente

Mouse Monoclonal Antibody

MW

Tampón de almacenamiento

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

Almacenamiento
(Desde la fecha de recepción)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

Métodos experimentales
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Métodos experimentales

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12891700/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37827214/

Datos de aplicación

IHC

Validado por Selleck

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded rat brain tissue with F1713 at 1:200 dilution.