EI1

N.º de catálogoS7611 Lote:S761101

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Datos técnicos

Fórmula

C₂₃H₂₆N₄O₂

Peso molecular

390.48

Número CAS

1418308-27-6

Solubilidad (25°C)*

In vitro

DMSO

42 mg/mL (107.55 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.260mg/ml (0.67mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 5.2 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.260mg/ml (0.67mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 5.2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción

EI1 es un potente y selectivo inhibidor de EZH2 con IC50 de 15 nM y 13 nM para EZH2 (WT) y EZH2 (Y641F), respectivamente.

Objetivos

EZH2 (Y641F) (Cell-free assay)	Ezh2 (wild-type) (Cell-free assay)
13 nM	15 nM

In vitro

En células de DLBCL, EI1 inhibe la metilación celular de H3K27 y activa la expresión del gen diana p16 de Ezh2. En fibroblastos embrionarios de ratón, este compuesto también inhibe H3K27me3 y la proliferación celular. Además, inhibe selectivamente el crecimiento de células DLBCL que portan la mutación de Ezh2, y causa detención del ciclo celular y apoptosis.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:^{^[1]}	Ensayo bioquímico Para la determinación de la IC50, EI1 se diluye en serie tres veces en DMSO para un total de 12 concentraciones, con una concentración inicial de 1 μM. La reacción se incuba a temperatura ambiente durante 120 min y se detiene añadiendo una solución de extinción (2,5% de TFA con 320 nM de d4-SAH). La producción de SAH se cuantifica utilizando un espectrómetro de masas de triple cuadrupolo API 4000 con Turbulon Spray acoplado a Prominence UFLC. El porcentaje de inhibición se normaliza utilizando controles positivos (sin inhibidor) y negativos (sin enzima), y la IC50 se calcula utilizando PRISM. Los estudios enzimológicos de competición de S-adenosil metionina (SAM) se realizan con una ligera modificación de las condiciones de reacción: 10 μM de este compuesto se utilizan como dosis inicial para la dilución en serie. El SAM se titula en un rango entre 1 μM y 50 μM (correspondiente a 1 × Km y 50 × Km), y el péptido sustrato está presente en la mezcla de reacción final en su condición saturada (10 μM). Para el perfilado de Histone Methyltransferase (HMT) en la Tabla 1, todas las HMT son proteínas recombinantes purificadas de Escherichia coli o del sistema de baculovirus. Se utilizaron el dominio catalítico de G9a, SuV39H2, Set7/9, CARM1, SETD8, NSD3, SETD2 y Dot1L, y la proteína SmyD2 de longitud completa en los ensayos bioquímicos. Las reacciones bioquímicas de HMT se caracterizan cuidadosamente con estudios enzimológicos y se determinan los Km del SAM y del sustrato. Las concentraciones de SAM y sustrato se mantienen en sus respectivos Km para la mayoría de las HMT, excepto para aquellas (SmyD2 y Set7/9) con un valor bajo de SAM-Km, para las cuales se utiliza 0,5 μM de SAM. Todas las reacciones de HMT se realizan utilizando el mismo formato de ensayo donde la producción de SAH de la reacción bioquímica se cuantifica por LC-MS.
Ensayo celular:^{^[1]}	Líneas celulares Ezh2 mutant DLBCL cells (WSU-DLCL2, SU-DHL6, Karpas422, DB, and SU-DHL4), Ezh2 wild-type DLBCL cells (OCI-LY19 and GA10), and Mouse embryonic fibroblasts (MEFs) Concentraciones ~10 μM Tiempo de incubación 11-15 days Método Exponentially growing diffused large B-cell lymphoma (DLBCL) cells are seeded in 12-well plates at a density of 1 × 10⁵ cells/mL with the indicated concentration of EI1. Viable cell number is determined every 3–4 d for up to 14 or 15 d by Vi-CELL. Mouse embryonic fibroblasts (MEFs) are seeded in a six-well plate at 2.5 × 10⁴ cell/mL and treated with this compound (3.3 μM) or 4-OH-tamoxifen (100 nM). Viable cell number is determined at days 3, 6 and 11. On days of cell counts, fresh growth medium and this chemical are replenished and cells split back to a density of 1 × 10⁵ cells/mL. Total cell number is expressed as split-adjusted viable cells per milliliter. IC50 is calculated by PRISM and all proliferation experiments are repeated more than two times and representative data are presented.

Ensayo de quinasa:^{^[1]}

Ensayo bioquímico
Para la determinación de la IC50, EI1 se diluye en serie tres veces en DMSO para un total de 12 concentraciones, con una concentración inicial de 1 μM. La reacción se incuba a temperatura ambiente durante 120 min y se detiene añadiendo una solución de extinción (2,5% de TFA con 320 nM de d4-SAH). La producción de SAH se cuantifica utilizando un espectrómetro de masas de triple cuadrupolo API 4000 con Turbulon Spray acoplado a Prominence UFLC. El porcentaje de inhibición se normaliza utilizando controles positivos (sin inhibidor) y negativos (sin enzima), y la IC50 se calcula utilizando PRISM. Los estudios enzimológicos de competición de S-adenosil metionina (SAM) se realizan con una ligera modificación de las condiciones de reacción: 10 μM de este compuesto se utilizan como dosis inicial para la dilución en serie. El SAM se titula en un rango entre 1 μM y 50 μM (correspondiente a 1 × Km y 50 × Km), y el péptido sustrato está presente en la mezcla de reacción final en su condición saturada (10 μM). Para el perfilado de Histone Methyltransferase (HMT) en la Tabla 1, todas las HMT son proteínas recombinantes purificadas de Escherichia coli o del sistema de baculovirus. Se utilizaron el dominio catalítico de G9a, SuV39H2, Set7/9, CARM1, SETD8, NSD3, SETD2 y Dot1L, y la proteína SmyD2 de longitud completa en los ensayos bioquímicos. Las reacciones bioquímicas de HMT se caracterizan cuidadosamente con estudios enzimológicos y se determinan los Km del SAM y del sustrato. Las concentraciones de SAM y sustrato se mantienen en sus respectivos Km para la mayoría de las HMT, excepto para aquellas (SmyD2 y Set7/9) con un valor bajo de SAM-Km, para las cuales se utiliza 0,5 μM de SAM. Todas las reacciones de HMT se realizan utilizando el mismo formato de ensayo donde la producción de SAH de la reacción bioquímica se cuantifica por LC-MS.

Ensayo celular:^{^[1]}

Líneas celulares
Ezh2 mutant DLBCL cells (WSU-DLCL2, SU-DHL6, Karpas422, DB, and SU-DHL4), Ezh2 wild-type DLBCL cells (OCI-LY19 and GA10), and Mouse embryonic fibroblasts (MEFs)
Concentraciones
~10 μM
Tiempo de incubación
11-15 days
Método
Exponentially growing diffused large B-cell lymphoma (DLBCL) cells are seeded in 12-well plates at a density of 1 × 10⁵ cells/mL with the indicated concentration of EI1. Viable cell number is determined every 3–4 d for up to 14 or 15 d by Vi-CELL. Mouse embryonic fibroblasts (MEFs) are seeded in a six-well plate at 2.5 × 10⁴ cell/mL and treated with this compound (3.3 μM) or 4-OH-tamoxifen (100 nM). Viable cell number is determined at days 3, 6 and 11. On days of cell counts, fresh growth medium and this chemical are replenished and cells split back to a density of 1 × 10⁵ cells/mL. Total cell number is expressed as split-adjusted viable cells per milliliter. IC50 is calculated by PRISM and all proliferation experiments are repeated more than two times and representative data are presented.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23236167/

Validación de productos por parte del cliente

: , , Oncotarget, 2015, 6(32):32410-25.

: , , Mol Cancer, 2017, 16(1):5

: Datos de [ , , Oncotarget, 2015, 6(32): 32410-32425. ]

Sellecks EI1 Ha sido citado por 6 Publicaciones

Genetic and epigenetic characterization of sarcoma stem cells across subtypes identifies EZH2 as a therapeutic target [ NPJ Precis Oncol, 2025, 9(1):7]	PubMed: 39789291
Epigenetic Reprogramming with Antisense Oligonucleotides Enhances the Effectiveness of Androgen Receptor Inhibition in Castration-Resistant Prostate Cancer [ Cancer Res, 2018, 78(20):5731-5740]	PubMed: 30135193
Epigenetic drift of H3K27me3 in aging links glycolysis to healthy longevity in Drosophila [ Elife, 2018, 7e35368]	PubMed: 29809154
Long non-coding RNA TUG1 is involved in cell growth and chemoresistance of small cell lung cancer by regulating LIMK2b via EZH2. [Niu Y, et al. Mol Cancer, 2017, 10.1186/s12943-016-0575-6]	PubMed: 28069000
The Human Immunodeficiency Virus 1 ASP RNA promotes viral latency by recruiting the Polycomb Repressor Complex 2 and promoting nucleosome assembly. [ Virology, 2017, 506:34-44]	PubMed: 28340355
NBAT1 suppresses breast cancer metastasis by regulating DKK1 via PRC2 [Hu P, et al. Oncotarget, 2015, 6(32):32410-25]	PubMed: 26378045

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