Cytarabine

La Cytarabine (AraC) se fosforila en una forma trifosfato (Ara-CTP) que involucra a la desoxicitidina quinasa (dCK), la cual compite con el dCTP para su incorporación al ADN y luego bloquea la síntesis de ADN al inhibir la función de las ADN y ARN polimerasas. Este compuesto muestra una mayor actividad inhibitoria del crecimiento hacia las células CCRF-CEM de tipo salvaje en comparación con otras células de leucemia mielógena aguda (AML) con un IC50 de 16 nM. [1] El aumento de las concentraciones de este químico (IC50 de 0,69 μM) da como resultado una disminución de la actividad metabólica de la línea celular leucémica de rata sensible RO/1, y la toxicidad celular puede ser altamente mejorada por la transfección con dCK humana wt (IC50 de 0,037 μM) pero no las formas dCK inactivas, empalmadas alternativamente. [2] Aparentemente, induce la apoptosis de las neuronas simpáticas de rata a 10 μM, de las cuales 100 μM muestran la toxicidad más alta y matan más del 80% de las neuronas en 84 horas, implicando la liberación del citocromo-c mitocondrial y la activación de la caspasa-3, y la toxicidad puede atenuarse por la eliminación de p53 y retrasarse por la deleción de bax. [3]

La Cytarabine es altamente efectiva contra las leucemias agudas, lo que causa el bloqueo y la sincronización característicos de G1/S, y aumenta el tiempo de supervivencia para las ratas Brown Norway leucémicas de una manera débilmente relacionada con la dosis, lo que indica que el uso de dosis más altas de este compuesto no contribuye a su eficacia antileucémica en humanos. [4] Este químico también causa retraso del crecimiento placentario y aumenta la apoptosis de las células trofoblásticas placentarias en la zona del laberinto placentario de las ratas Slc:Wistar preñadas, lo que aumenta 3 horas después del tratamiento y alcanza su punto máximo a las 6 horas antes de volver a los niveles de control a las 48 horas, con una proteína p53 notablemente mejorada, genes diana transcripcionales de p53 como p21, ciclina G1 y fas y actividad de caspasa-3. [5]

• Ensayo de inhibición del crecimiento in vitro

  La solución madre de Cytarabine se prepara en etanol absoluto, y se preparan diluciones en serie de este compuesto. Las células CCRF-CEM se suspenden en medio RPMI suplementado con 10% de FBS, 0.1% de gentamicina y 1% de piruvato de sodio. Las células se suspenden en sus respectivos medios para dar volúmenes de 10 mL de suspensión celular a una densidad final de 3-6 × 10⁴ células/mL. Se transfieren volúmenes apropiados de esta solución química a las suspensiones celulares, y la incubación se continúa durante 72 horas. Las células se centrifugan y se resuspenden en medio fresco libre de este compuesto, y se determinan los recuentos celulares finales. Los datos se analizan mediante el ajuste de curva sigmoidea del recuento celular versus la concentración de este químico, y los resultados se expresan como el IC50 (concentración de este compuesto que inhibe el crecimiento celular al 50% del valor de control).

• Líneas celulares

  Rat leukemic cell lines RCL/0, RO/1 and K7 and human myelomonocytic leukemic U937

• Concentraciones

  ~100 μM

• Tiempo de incubación

  24, 48 and 72 hours

• Método

  Cells are incubated in the presence of different concentrations of Cytarabine at 37 °C for 24, 48, and 72 hours. At the time of 20-, 44-, or 68-hour incubation in the presence of this compound, 10 mL of cell proliferation reagent WST-1 solution is added. After 2- and 4-hour incubation with WST-1, cell metabolic activity is assessed with colorimetric changes quantified by measuring the absorbance in a spectrophotometer at 450 nm. And cell division times are calculated from eosin counting in parallel with viability assay

• Modelos animales

  Brown Norway rat with myelocytic leukaemia

• Dosificaciones

  5 - 1000 mg/kg

• Administración

  Injection i.v.