Chaetocin

En células de cultivo de tejido de Drosophila SL-2, Chaetocin causa la inhibición de SU(VAR)3-9 y el número de moléculas de H3 dimetiladas en Lys9, y también inhibe el crecimiento celular. [1]

En células de hepatoma humano HepG2, Hep3B y Huh7, este compuesto inhibe las respuestas hipóxicas mediadas por HIF-1. [2]

También inhibe potentemente la proliferación y la formación de colonias en una amplia gama de líneas celulares cancerosas con IC50 de 2-10 nM. [3]

En ratones portadores de tumores Hepa 1c1c-7, Chaetocin (0,25 mg/kg, i.p.) inhibe el crecimiento tumoral al desregular la angiogénesis mediada por HIF-1[alpha]. [2]

En ratones desnudos portadores de tumores SKOV3, el tratamiento con este compuesto (0,25 mg/kg, i.p.) retrasa significativamente el crecimiento tumoral con una evidencia mínima de toxicidades. [3]

• Ensayos de metilación

  A menos que se indique lo contrario, las reacciones se realizan de la siguiente manera: 1 g de enzima purificada (dSU(VAR)3-9 213; GST-hSUV39H1(82-412); GST-ncDIM5(19-318) y GSTmG9a(621-1000); dPRSET7(1-691); His-SET7/9(109-366) o complejo enzimático expresado en un sistema de expresión baculoviral (dE(z), dSU(Z)12, dp55, dESC)) se incubaron durante 30 minutos con 1 g de un péptido que contenía los primeros 19 aminoácidos de H3 más un residuo de cisteína adicional (ARTKQTARKSTGGKAPRKQC) en un volumen total de 40 μl en BC25 (10 mM HEPES pH 7,6, 25 mM NaCl, 1 mM EDTA, 10 % glicerol). Todas las enzimas, excepto el complejo E(z), tenían una actividad específica similar entre 5-10 nmol/min/mg. Para el complejo E(z), la actividad específica es aproximadamente 5-10 veces menor, lo que probablemente se debe a una formación incompleta del complejo completo que se requiere para la actividad más alta. Como donador de metilo, la S-Adenosil [metil-3H] metionina (SAM) está presente en la reacción a una concentración final de 40 M con una actividad específica de 0,3 Ci/mmol. Las reacciones se detienen añadiendo 1/10 del volumen de ácido acético al 100 % y la incorporación de radiactividad se mide aplicando 30 μl de la reacción en papel de filtro P81 y el consiguiente recuento por centelleo. Para el cribado de inhibidores, se añade 1 μl de este compuesto con una concentración de 10 g/l a cada reacción. En los casos en que se utiliza PRSET7 o el complejo E(z) como enzima, los nucleosomas recombinantes (1 g) o la H3 recombinante (1 g) respectivamente reemplazaron el péptido H3 como sustrato.

• Líneas celulares

  HEK293T

• Concentraciones

  125 nM

• Tiempo de incubación

  24 h

• Método

  Cells were treated with chaetocin (125 nM) or DMSO for 24 h.

• Modelos animales

  Hur7 tumor-bearing mice, Hepa 1c1c-7 tumor-bearing mice

• Dosificaciones

  0.25 mg/kg

• Administración

  i.p.