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Descripción biológica
| Especificidad | CD163L1 Antibody [C10D1] detecta niveles endógenos de proteína CD163L1 total. |
|---|---|
| Antecedentes | CD163L1, también conocido como CD163 molecule-like 1 o M160, es una proteína de membrana de tipo I de la superfamilia de receptores depuradores ricos en cisteína (SRCR) del grupo B que presenta múltiples dominios SRCR (típicamente 9–12), un único segmento transmembrana y una cola citoplasmática que media la endocitosis a través de una vía dependiente de clatrina e independiente del entrecruzamiento de ligando. Procede de una duplicación evolutiva tardía del gen CD163, CD163L1 se expresa en gran medida en subconjuntos específicos de macrófagos tisulares (a menudo co-localizando con CD163), pero está mínimamente presente o ausente en monocitos, macrófagos alveolares, glía y células de Kupffer; dos variantes de empalme citoplasmáticas influyen aún más en su localización subcelular. CD163L1 sirve como un receptor depurador endocítico que probablemente une ligandos aún no identificados para mediar la eliminación y promover la resolución de la inflamación a través de la señalización antiinflamatoria y el mantenimiento de la homeostasis tisular, diferenciándose de CD163, que específicamente depura los complejos de hemoglobina-haptoglobina. CD163L1 no muestra afinidad por la hemoglobina-haptoglobina ni por las bacterias probadas, y no forma complejos proteicos conocidos. Su expresión regulada durante la diferenciación de monocitos a macrófagos apoya la modulación inmune innata, con relevancia en enfermedades inflamatorias como la aterosclerosis, potencialmente a través de la eliminación de oxidantes similar a CD163, y en contextos autoinmunes al amortiguar las respuestas inmunes excesivas. |
Información de uso
| Aplicación | IHC | Dilución |
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|---|---|---|---|---|---|
| Reactividad | Human | ||||
| Fuente | Rabbit Monoclonal Antibody | MW | |||
| Tampón de almacenamiento | PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 | Almacenamiento (Desde la fecha de recepción) |
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years | ||
| IHC |
Experimental Protocol：
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
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Referencias
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