CCT007093

N.º de catálogoS7485 Lote:S748501

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Datos técnicos

Fórmula

C15H12OS2
Peso molecular 272.39 Número CAS 176957-55-4
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 2.5 mg/mL (9.17 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO Corn oil

Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.

 1.000mg/ml (3.67mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 20 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción CCT007093 es un potente inhibidor de PPM1D (WIP1) con un IC50 de 8,4 μM.
Objetivos
PPM1D
8.4 μM
In vitro CCT007093 inhibe selectiva y potentemente las líneas celulares de tumores humanos (MCF-7, KPL-1 y MCF-3B) que sobreexpresan PPM1D. Este compuesto induce la muerte celular a través de la activación de la actividad de la quinasa p38. En combinación con paclitaxel, resulta en una inhibición sinérgica de las cuatro líneas celulares de cáncer de mama triple negativo (TNBC) resistentes a paclitaxel. Este químico promueve selectivamente la apoptosis en células de cáncer de mama y queratinocitos transformados de la piel que expresaron Wip1 ectópicamente, mientras que atenúa la respuesta apoptótica mediada por UV tanto en queratinocitos de la piel como en un modelo celular nulo para Wip1.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:[1]
  • Ensayo de phosphatase in vitro

    PPM1D recombinante (20-50 pmol) se diluye en tampón Tris (50 mM, pH 8), NaCl (100 mM), β-mercaptoetanol (1 mM) o DTT (1 mM) y se trata con MnCl2 (0, 1, 10 y 20 mM) o MgCl2 (0 y 40 mM). Cuando corresponda, se añaden inhibidores de PPM1D (10-50 μM) y la mezcla del ensayo se incuba durante 30 min a temperatura ambiente. A continuación, se añade fosfo-P38 recombinante (200 pmol) y la mezcla se incuba a 37 °C durante 1 h. La reacción se detiene mediante la adición de un exceso de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), tampón de carga de muestra de dodecil sulfato de sodio y ebullición durante 5 min a 95 °C, seguido de electroforesis en gel y Western blotting.
Ensayo celular:[1]
  • Líneas celulares

    MCF-7, KPL-1, and MCF-3B cells

  • Concentraciones

    ~50 μM

  • Tiempo de incubación

    14 days

  • Método

    Cells are transfected with a pSUPER plasmid and an additional plasmid expressing the blasticidin resistance gene (pEFBsd) in a molar ratio of 10:1. Cells are plated in 10 cm plates 24 h after transfection. Blasticidin selection (5 μg/ml) is initiated 48 h post-transfection and replenished every 3 days. Colonies are fixed in methanol and stained with crystal violet after 14 days. Colonies are quantified on a Colcount and the surviving fraction (SF) determined.

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17700519/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20576088/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24126074/

Validación de productos por parte del cliente

(A-B)Twenty-four hours after plating 1×105 shh-EGFP cells, media was changed to serum-free media containing vehicle (Vh), DMSO, CCT007093 (CCT, 5µM), and/or Shh (3µg/mL). Cells were also transduced with LentiORF-RFP-CTRL or LentiORF-YFP-WIP1 lentivirus. 48 hours later, cells were fixed in 4% paraformaldehyde, permeabilized, incubated with α-WIP1 or α-Ki-67 antibody, and mounted using media containing DAPI (left-hand panels). Quantification of cells, per high power field (HPF), that express green fluorescent protein (GFP) or Ki-67 (right-hand panels). Bars, mean of cell counts from 10 representative fields for each experimental condition.

Datos de [ , , Oncogene, 2016, 35(42):5552-5564. ]

Sellecks CCT007093 Ha sido citado por 1 Publicación

WIP1 modulates responsiveness to Sonic Hedgehog signaling in neuronal precursor cells and medulloblastoma [Wen J, et al. Oncogene, 2016, 35(42):5552-5564] PubMed: 27086929

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