Bortezomib

Bortezomib, un dipéptido de ácido borónico, es un inhibidor altamente selectivo y reversible del Proteasome 26S que funciona principalmente en la degradación de proteínas mal plegadas y es esencial para la regulación del ciclo celular. Se ha demostrado que la exposición a este compuesto estabiliza p21, p27 y p53, así como las proteínas proapoptóticas Bid y Bax, la caveolina-1 y el inhibidor κB-α, lo que previene la activación de las vías de supervivencia celular inducidas por el factor nuclear κB. También promueve la activación de la c-Jun-NH2 terminal quinasa proapoptótica, así como la respuesta al estrés del retículo endoplásmico. La alteración de los niveles de estas proteínas celulares conduce a la inhibición de la proliferación, la migración y la promoción de la apoptosis de las células cancerosas. [2] Se ha demostrado que este químico penetra en las células e inhibe la proteólisis intracelular mediada por el Proteasome de proteínas de larga vida con una concentración que inhibe el 50% de la proteólisis de ∼0,1 μM. La inhibición media del crecimiento del 50% para este compuesto en todo el panel de 60 líneas celulares de cáncer derivadas de múltiples tumores humanos del Instituto Nacional del Cáncer de EE. UU. (NCI) es de 7 nM. El tratamiento de células PC-3 con él (100 nM) durante 8 h resulta en la acumulación de células en G2-M, con una disminución correspondiente en el número de células en G1. Mata las células PC-3 a las 24 y 48 h con una IC50 de 100 y 20 nM, respectivamente. Este agente induce la condensación nuclear a las 16-24 h después del tratamiento. Su tratamiento conduce a la escisión de PARP de manera dependiente del tiempo con concentraciones tan bajas como 100 nM siendo efectivas a las 24 h. [1]

Los efectos anticancerosos de Bortezomib como agente único se han demostrado en modelos de xenoinjertos de mieloma múltiple, leucemia de células T adulta, cáncer de pulmón, mama, próstata, páncreas, cabeza y cuello, y colon, y en melanoma. [2] La administración oral de este compuesto a 1,0 mg/kg diario durante 18 días causa retrasos en el crecimiento tumoral, así como una disminución en el número de metástasis en el modelo de cáncer de pulmón de Lewis. Este compuesto a una dosis única de hasta 5 mg/kg disminuyó significativamente la fracción superviviente de células tumorales mamarias. La administración semanal de este químico a 1,0 mg/kg durante 4 semanas reduce el crecimiento tumoral en un 60% en modelos de xenoinjertos murinos de cáncer de próstata. El tratamiento con este agente a 1,0 mg/kg durante 4 semanas resulta en una reducción del 72% u 84% en el crecimiento de xenoinjertos murinos de cáncer de páncreas, así como un aumento en la apoptosis de las células tumorales. Este compuesto a 1,0 mg/kg resulta en una inhibición significativa del crecimiento de xenoinjertos de plasmocitoma humano, un aumento en la apoptosis de las células tumorales y la supervivencia general, y una disminución en la angiogénesis tumoral. [3]

• Métodos Cinéticos

  En una corrida cinética típica, se añaden 2,00 mL de tampón de ensayo (20 mM HEPES, 0,5 mM EDTA, 0,035% SDS, pH 7,8) y Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC en DMSO a una cubeta de fluorescencia de 3 mL, y la cubeta se coloca en el portaceldas con camisa de un espectrofotómetro de fluorescencia. La temperatura de reacción se mantiene a 37 ℃ mediante un baño de agua con circulación. Una vez que la solución de reacción ha alcanzado el equilibrio térmico (5 minutos), se añaden de 1 μL a 10 μL de la solución madre de enzima a la cubeta. El progreso de la reacción se monitorea mediante el aumento de la emisión de fluorescencia a 440 nm (λ_ex= 380 nm) que acompaña la escisión de AMC de los sustratos péptido-AMC.

• Líneas celulares

  Human multiple myeloma cells line U266

• Concentraciones

  ~10 μM

• Tiempo de incubación

  2 days

• Método

  The inhibitory effect of Bortezomib on cell growth is assessed by measuring MTT dye absorbance of the cells. Cells from 48-hour cultures are pulsed with 10 μL of 5 mg/mL MTT to each well for the last 4 hour of 48-hour cultures, followed by 100 μL of isopropanol containing 0.04 N HCl. Absorbance is measured at 570 nm using a spectrophotometer.

• Modelos animales

  Human plasmacytoma xenografts RPMI 8226

• Dosificaciones

  1 mg/kg

• Administración

  i.v. twice weekly for 4 weeks, then once weekly