Bleomycin sulfate

Las UT-SCC-12A y UT-SCC-12B son ambas más resistentes al Bleomycin sulfate con IC50 de 14,2 nM y 13 nM, respectivamente. [1] Los macrófagos alveolares incubados con 0,01 μg/mL a 1 μg/mL de este compuesto durante 18 horas secretan significativamente más factor de crecimiento de fibroblastos que los macrófagos incubados sin este producto químico. Los macrófagos estimulados con este compuesto continúan produciendo cantidades significativas de factor de crecimiento de fibroblastos incluso después de que este producto químico se retira y se reemplaza con un medio fresco (sin Bleomycin sulfate). La secreción de factor de crecimiento de fibroblastos por los macrófagos alveolares estimulados por este compuesto es inhibida por cicloheximida y los inhibidores de la 5-lipoxigenasa NDGA (ácido nordihidroguaiarético) y BW755c, lo que indica no solo un requisito para la síntesis de proteínas sino también para los metabolitos de la vía de la 5-lipoxigenasa del metabolismo del ácido araquidónico para la expresión completa de la actividad. [2] La incubación de este producto químico (400 µg/mL) durante 24 horas disminuye la viabilidad de las células NTera-2 y aumenta las actividades de caspasa-3, -8 y -9, los niveles de Bax y citocromo c citoplasmático y disminuye los niveles de Bcl-2. [3] En términos de aberraciones inestables, el efecto clastogénico de este compuesto en las células ADIPO-P2 persiste durante al menos 10 días después de la exposición. La inestabilidad telomérica inducida por este producto químico en células de mamíferos persiste durante varias generaciones después de la exposición. Además, la aparición de fusiones teloméricas en células expuestas a este compuesto 10 días después del tratamiento sugiere que este producto químico puede inducir inestabilidad telomérica tardía. [4]

7 días después del Bleomycin sulfate, las células CD45+ en BALf en NOX-/- son 1,7 veces > WT, el 57% de las cuales son Mf que disminuyen en un 67% en WT y un 83% en NOX-/- para el día 21. [5]

• Líneas celulares

  ADIPO-P2 cells

• Concentraciones

  2.5 μg/mL

• Tiempo de incubación

  30 minutes

• Método

  ADIPO-P2 cells are grown in D-MEM high glucose medium supplemented with 20% fetal calf serum, penicillin (100 U/mL) and streptomycin (100 μg/mL) at 37 °C and 5% CO₂ atmosphere. Cells are cultured as monolayer in TC25 Corning flasks containing 1.5 × 10⁵ cells/mL. For each experiment, two flasks are set up, one for the control and one for the treated culture. During the log phase of growth ADIPO-P2 cells are treated with a 30 minutes pulse of 2.5 μg/mL of Bleomycin sulfate. Control cultures are set up in parallel but not exposed to this compound. Time of exposure and concentration of this chemical are chosen according to previous studies carried out in our laboratory with mammalian cells exposed to it. At the end of the pulse treatment with this compound, the cells are washed twice with Hank's balanced salt solution and kept in culture with fresh culture medium until harvesting. Cells are continuously maintained in culture during 5 passages or subcultures after treatment. Subcultivation is carried out whenever the cultures became confluent (approximately 4 × 10⁵ cells/mL of culture medium). To estimate cell growth, at the time of subcultivation cells are collected by trypsinization, an aliquot of about 200 μL stained with 0.4% trypan blue, and the number of viable cells is determined. Cells are then suspended in fresh culture medium and dispensed into new culture flasks containing 1 × 10⁵ cells/mL to continue growing. The rest of the cells is discarded or dispensed in another flask for cytogenetic analysis, which is performed at 18 hours and 10 days after the end of treatments. To analyze chromosomal aberrations, colchicine (0.1 μg/mL) is added to cell cultures during the last 3 hours of culture. Chromosome preparations are made following standard procedures. After harvesting, cells are hypotonically shocked, fixed in methanol:acetic acid (3:1), spread onto glass slides and processed for PNA-FISH. Two independent experiments are carried out.

• Modelos animales

  CD-1 mice

• Dosificaciones

  5 mg/kg, 2 ml/kg

• Administración

  Administered via i.t.