Copanlisib (BAY 80-6946)

Tanto en las células KPL4 como en las células PC3 estimuladas con LPA, BAY 80-6946 reduce los niveles de pAKT. En un subconjunto de líneas celulares de cáncer humano con mutaciones de PIK3CA y/o sobreexpresión de HER2, BAY 80-6946 muestra actividad antiproliferativa e induce apoptosis. [1] La combinación de terapias dirigidas a HER2 y BAY 80-6946 inhibe el crecimiento de manera más efectiva que cualquiera de las terapias utilizadas solas, y puede restaurar la sensibilidad al trastuzumab y al lapatinib en las células. [2]

En el modelo de xenoinjerto tumoral de KPL4 o HCT116 en ratas, BAY 80-6946 (6 mg/kg, i.v.) induce una regresión tumoral completa del 100%. En ratones desnudos con modelos de NSCLC Lu7860 resistente a erlotinib, derivados de pacientes, y modelos de tumores mamarios luminales MAXF1398 derivados de pacientes, BAY 80-6946 (14 mg/kg, i.v.) también provoca la inhibición del crecimiento tumoral. [1]

• Ensayos bioquímicos de lipid quinasas

  El efecto de BAY 80-6946 sobre la actividad de PI3Kα, PI3Kβ y PI3Kγ se mide mediante la inhibición de la incorporación de ³³P en el fosfatidilinositol (PI) en placas MaxiSorp® de 384 pocillos recubiertas con 2 µg/pocillo de PI y fosfatidilserina (PS) (relación molar 1:1). En cada ensayo de isoforma de PI3K, se utilizan 9 µL de tampón de reacción (50 mM MOPSO, pH 7.0, 100 mM NaCl, 4 mM MgCl₂, 0.1% BSA) que contienen 7.5 ng de proteína p110α o p110β truncada en el N-terminal con etiqueta His, o 25 ng de proteína p110γ humana purificada. La reacción se inicia añadiendo 5 µL de una solución de ATP 40 µM que contiene 20 µCi/mL de [³³P]-ATP. Después de 2 horas de incubación a temperatura ambiente, la reacción se termina añadiendo 5 µL de una solución de EDTA 25 mM. Las placas se lavan y luego se añaden 25 µL de cóctel de centelleo Ultima Gold™. La radioactividad incorporada en el sustrato de PI inmovilizado se determina con un contador de centelleo líquido BetaPlate.

• Líneas celulares

  A series of cancer cell lines

• Concentraciones

  ~5 μM

• Tiempo de incubación

  72 hours

• Método

  Cell proliferation over a 72-hour period is determined using the CellTiter-Glo® luminescent cell viability kit. Briefly, cells are plated in separate microtiter plates. Following an overnight incubation at 37ºC, luminescence values in the t=0 hour plates are determined. Test compounds diluted in growth medium are added to the t=72 hour plates, and the cells are then incubated for 72 hours at 37ºC. Luminescence values are determined with a Wallac 1420 Victor2™ 1420 multilabel HTS counter after a 10-minute reaction with CellTiter-Glo® solution. The percentage inhibition of cell growth is calculated by subtracting the luminescence values in the t=0 hour plates from the corresponding values in the t=72 hour plates. Differences in values between drug-treated cells and controls are used to determine the percentage inhibition of cell growth.

• Modelos animales

  Rats bearing KPL4 or HCT116 xenografts

• Dosificaciones

  6 mg/kg

• Administración

  i.v.