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In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.
0.100mg/ml
(0.25mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 2 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.
0.100mg/ml
(0.25mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble. * Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes. * Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)
Preparación de soluciones madre
Actividad biológica
Descripción
BAM 7 es un activador directo y selectivo de la Bax proapoptótica con un EC50 de 3,3 μM.
Objetivos
Bax
3.3 μM
In vitro
BAM7 se une directamente a la hendidura de unión a BH3, previamente no caracterizada, en la cara N-terminal de BAX. Este compuesto es selectivo para la hendidura de unión a BH3 en la cara N-terminal de BAX. Interactúa directamente con BAX en la misma superficie utilizada por la hélice BH3 de BIM para desencadenar la activación de BAX. Este químico resulta en una activación funcional de BAX. Desencadena la conversión de BAX de monómero a oligómero de manera dependiente de la dosis y el tiempo, cuya cinética se aproxima a la saturación con una relación de dosis BAX:BAM7 de 1:8. Este compuesto desencadena in vitro la oligomerización de BAX, la formación de poros mediada por BAX y la muerte celular dependiente de BAX. Induce selectivamente la Apoptosis mediada por BAX al desencadenar las características distintivas de la activación intracelular de BAX. Este químico solo mata la línea celular que contiene BAX, provocando las características bioquímicas y morfológicas de la Apoptosis mediada por BAX.
Características
No interactúa con el bolsillo de unión a BH3 de las proteínas antiapoptóticas o con BAK proapoptótico e induce la muerte celular de manera dependiente de BAX.
Ensayos de unión por polarización de fluorescencia
Las curvas de unión directa se generan primero incubando FITC-BIM SAHB (50 nM) con diluciones en serie de BAX de longitud completa, BCL-XLΔC, MCL-1ΔNΔC, BFL-1/A1ΔC o BAKΔC, y la polarización de fluorescencia se mide a los 20 minutos en un lector de microplacas SpectraMax M5. Para los ensayos de competición, una dilución en serie de este compuesto o de BIM SAHB acetilado (Ac-BIM SAHB) se combina con FITC-BIM SAHB (50 nM), seguido de la adición de proteína recombinante a una concentración de ~EC75, según lo determinado por el ensayo de unión directa (BAX, BAKΔC: 500 nM; BCL-XLΔC, MCL-1ΔNΔC, BFL-1/A1ΔC: 200 nM). La polarización de fluorescencia se mide a los 20 minutos y los valores de IC50 se calculan mediante análisis de regresión no lineal de las curvas de unión competitiva utilizando el software Prism.
MEFs (2.5 × 103 cells per well) are seeded in 96-well opaque plates for 18-24 h and then incubated with serial dilutions of BAM7, ANA-BAM16 or vehicle (0.15% (v/v) DMSO) in DMEM at 37 °C in a final volume of 100 μL. Cell viability is assayed at 24 h by addition of CellTiter-Glo reagent according to the manufacturer’s protocol, and luminescence is measured using a SpectraMax M5 microplate reader. Viability assays are performed in at least triplicate, and the data are normalized to vehicle-treated control wells.
Referencias
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22634637/
Sellecks BAM7 Ha sido citado por 3 Publicaciones
Small-molecule allosteric inhibitors of BAX.
[ Nat Chem Biol, 2019, 15(4):322-330]
Drug manipulation of pro-and anti-apoptotic Bcl-2 proteins in the regulation of Parkin-mediated mitophagy in human breast cancer cells
[ Baltimore, Maryland , 2018, ]
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