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In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble. * Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes. * Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)
Preparación de soluciones madre
Actividad biológica
Descripción
Apoptosis Activator 2 induce fuertemente la activación de la caspase-3, la escisión de PARP y la fragmentación del ADN, lo que conduce a la destrucción de las células (dependiente de Apaf-1) con una IC50 de ~4 μM, inactivo para las células HMEC, PREC o MCF-10A.
Objetivos
Caspase-3
In vitro
Apoptosis Activator 2 (20 μM) a la concentración reducida de citocromo c aumenta la fracción de Apaf-1 en el apoptosoma en 1,5 veces hasta un 33%. Este compuesto aumenta la extensión de la activación de la caspase-3 a un nivel reducido de citocromo c y la activación de la caspase-3 en 4 veces. Induce fuertemente la activación de la caspase-3, la escisión de PARP y la fragmentación del ADN, y finalmente mata las células con un IC50 de 4 μM. Este activador induce la Apoptosis de PBL, HUVEC, Jurkat, Molt-4, CCRF-CEM, BT-549, MDA-MB-468 y NCI-H23 con un IC50 de 50 μM, 43 μM, 4 μM, 6 μM, 9 μM, 20 μM, 44 μM y 35 μM. Ejerce un efecto citostático en la mayoría de las líneas celulares tumorales probadas, inhibiendo el crecimiento celular en un 50-100% a 10 μM en 40 de 48 líneas celulares probadas. Este químico induce la muerte celular al desencadenar la formación de apoptosomas. El nivel de expresión de En1 no tiene una influencia significativa en las tasas de supervivencia de los cultivos de mesencéfalo ventral para este compuesto (-8,1 ± 6,0%). La tasa de supervivencia no se altera significativamente si se emplean los otros tres reactivos (-10,7 ± 4,7%) para este activador. Este compuesto (10 μM) induce Apoptosis en células AGS según la evaluación por escalera de ADN apoptótico y el ensayo Tunel. Este (10 μM) mejora la inducción de Apoptosis por liposomas conjugados anti-TROP2. La ciclohexamida (10 μg/mL) o zVAD (50 μM) protege significativamente contra la toxicidad de este químico en cultivos neuronales. Este activador (3 μM) produce numerosas neuronas con núcleos picnóticos sugestivos de muerte celular que implica Apoptosis. DHT (10 nM) o E2 (10 nM) protege significativamente contra la toxicidad de este compuesto en cultivos neuronales.
Los extractos citoplasmáticos de células HeLa se preparan según informes publicados anteriormente. Apoptosis Activator 2 en DMSO se distribuyen en placas de microtitulación de 96 pocillos a una concentración final de 1 mM (la concentración final de DMSO es del 1% v/v). A cada pocillo se añaden 250 μg de proteína total de extractos citoplasmáticos en tampón HEB (50 mM Hepes, pH 7,4/50 mM KCl/5 mM EGTA/2 mM MgCl), con 2 mM DTT, 2 μM citocromo c y 0,5 μM de sustrato DEVD-AFC (Asp-Glu-Val-Asp-7-amino-4-trifluorometilcumarina) en un total de 150 μL. Las placas se incuban a 37 ℃ y la fluorescencia se lee en un lector de placas LJL Biosystems a intervalos de 10 minutos.
All viable cells within the defined field of a microscope reticle grid are counted using a manual mechanical counter by an experimenter blinded to condition. Cells are scored viable on the basis of both positive staining with the vital dye calcein acetoxymethyl ester and the morphological criterion of a smooth, spherical soma. Counts of viable cells are made in four non-overlapping fields per culture well with each condition represented by 3 separate wells. The number of viable cells counts per well for vehicle-treated control conditions ranged from 100-200. All experiments are repeated in at least 3 independent culture preparations. Raw cell count data are statistically analyzed with one-way ANOVA, followed by between group comparisons using the Fisher LSD test (significance indicated by P < 0.05). Cell viability is presented graphically as a percentage of live cells in the vehicle-treated control condition.
Referencias
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12808146/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19291307/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23181231/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20561156/
Sellecks Apoptosis Activator 2 Ha sido citado por 5 Publicaciones
ARNTL2 upregulation of ACOT7 promotes NSCLC cell proliferation through inhibition of apoptosis and ferroptosis
[ BMC Mol Cell Biol, 2023, 24(1):14]
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