Degrasyn (WP1130)

Además de inducir una rápida regulación a la baja de Bcr/Abl sin afectar a Bcr o c-Abl, Degrasyn (WP1130) también regula la estabilidad de Jak2 y c-Myc sin afectar a otras cinasas (HER1, HER2, c-Kit, FAK, ERK1, ERK2, Akt, Btk, Src y Src-related kinases) o factores de transcripción (p53 de tipo salvaje, STAT1, STAT3, STAT5, c-Jun, NF-κB y Max). A diferencia de la adaphostina, este compuesto induce la regulación a la baja de Bcr/Abl en 60 minutos. Es más eficaz para inducir Apoptosis de células tumorales mieloides y linfoides con una CI50 de ~0,5-2,5 μM en comparación con precursores hematopoyéticos CD34⁺ normales, fibroblastos dérmicos o células endoteliales con una CI50 de ~5-10 μM. Este químico (5 μM) regula a la baja de forma específica y rápida la proteína Bcr/Abl de tipo salvaje y la mutante T315I sin afectar la expresión del gen bcr/abl ni activar la vía de degradación proteasomal en células de leucemia mieloide crónica (LMC), acompañada de la inducción de Apoptosis. Es más eficaz para reducir la formación de colonias de células leucémicas en comparación con las células progenitoras normales, y eficaz contra células leucémicas primarias que albergan la mutación T315I. [1] Este compuesto induce una rápida degradación dependiente del proteasoma de la proteína c-Myc en el mieloma múltiple MM-1 y otras líneas celulares tumorales, correlacionada con la inhibición del crecimiento tumoral. [2] A diferencia de AG490, actúa como un inhibidor de deubiquitinasa (DUB) parcialmente selectivo para inducir una acumulación rápida y marcada de proteínas poliubiquitinadas (unidas a K48/K63) en agresomas yuxtanucleares sin afectar la actividad del proteasoma. Este químico (5 μM) inhibe directamente la actividad DUB de USP9x, USP5, USP14, UCH-L1 y UCH37, pero no de UCH-L3, lo que resulta en la regulación a la baja de proteínas antiapoptóticas y la regulación al alza de proteínas proapoptóticas, como MCL-1 y p53. [3]

La administración de WP1130 inhibe el crecimiento de tumores K562, así como de células BaF/3 que expresan Bcr/Abl de tipo salvaje y Bcr/Abl mutante T315I trasplantadas en ratones nude. [1] De acuerdo con la regulación a la baja de c-Myc, este compuesto muestra una potente actividad inhibidora contra los tumores de melanoma A375 establecidos en ratones nude. [2]

• Líneas celulares

  BV173, BV173R, K562, and BaF/3

• Concentraciones

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Tiempo de incubación

  72 hours

• Método

  Cells are treated with increasing concentrations of WP1130 (0.08-10 μM) in 96-well plates. Plates are incubated at 37 °C for 72 hours, after which 20 μL of MTT reagent is added, and the plates are incubated at 37 °C for another 2 hours. Cells are lysed with 100 μL lysis buffer (20% sodium dodecyl sulfate [SDS] in 50% N, N-dimethylformamide adjusted to pH 4.7 with 80% acetic acid and 1 M hydrochloric acid; final concentration of acetic acid is 2.5% and hydrochloric acid is 2.5%) and incubated for 6 hours. The optical density of each sample at 570 nm is determined with a SPECTRA MAX M2 plate reader.

• Modelos animales

  Swiss Nu/Nu mice transplanted with K562 tumor cells, BaF/3wt cells, or BaF/3/T315I cells

• Dosificaciones

  ~40 mg/kg every other day

• Administración

  Injected intraperitoneally