Tozasertib (VX-680)

N.º de catálogoS1048 Lote:S104805

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Datos técnicos

Fórmula

C23H28N8OS
Peso molecular 464.59 Número CAS 639089-54-6
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 93 mg/mL (200.17 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción Tozasertib (VX-680) es un inhibidor pan-Aurora, principalmente contra Aurora A con un Kiapp de 0,6 nM en un ensayo sin células, menos potente contra Aurora B/Aurora C y 100 veces más selectivo para Aurora A que otras 55 quinasas. Las únicas excepciones son la tirosina quinasa-3 relacionada con Fms (FLT-3) y la tirosina quinasa BCR-ABL, que son inhibidas por este compuesto con un Ki de 30 nM para ambas. Induce apoptosis y autophagy, y se encuentra en Fase 2.
Objetivos
Aurora A
(Cell-free assay)		 Aurora C
(Cell-free assay)		 Aurora B
(Cell-free assay)		 FLT3
(Cell-free assay)		 Bcr-Abl
(Cell-free assay)
0.6 nM(Ki app) 4.6 nM(Ki app) 18 nM(Ki app) 30 nM(Ki) 30 nM(Ki)
In vitro Aunque su perfil multi-quinasa, Tozasertib (VX-680) induce una citotoxicidad similar con una IC50 de aproximadamente 300 nM y exhibe un fenotipo inhibidor tipo AUR B de arresto G2/M, endorreduplicación y apoptosis en células BaF3 transfectadas con quinasas ABL o FLT-3 (mutante y tipo salvaje). Este compuesto previene la proliferación de CAL-62 de manera tiempo-dependiente. El tratamiento durante 14 días disminuye significativamente el número y tamaño de las colonias en aproximadamente un 70% en 8305C y un 90% en CAL-62, 8505C y BHT-101. El tratamiento de las diferentes células ATC con él inhibe la proliferación con una IC50 entre 25 y 150 nM. Afecta significativamente la capacidad de las diferentes líneas celulares para formar colonias en agar blando. El análisis de la actividad de la caspasa-3 indica que VX-680 induce apoptosis en las diferentes líneas celulares. Las células CAL-62 expuestas durante 12 horas al compuesto mostraron una acumulación de células con un contenido de ADN ≥4N. El análisis de lapso de tiempo demuestra que las células CAL-62 tratadas salen de la metafase sin dividirse. Además, la fosforilación de la histona H3 se anula después de su tratamiento. Tiene una actividad inhibidora significativa contra BCR-Abl que porta la mutación T315I en muestras derivadas de pacientes.
In vivo Tozasertib (VX-680) provoca una marcada disminución del tamaño del tumor en un modelo de xenoinjerto de LMA humana (HL-60). En ratones desnudos tratados con él a 75 mg/kg, dos veces al día por vía intraperitoneal (b.i.d. i.p.) durante 13 días, los volúmenes tumorales medios se reducen en un 98%. La disminución del crecimiento tumoral es dosis-dependiente y significativa a una dosis de 12.5 mg/kg b.i.d. Este compuesto es bien tolerado, con una pequeña disminución del peso corporal observada solo a la dosis más alta. También desencadena la regresión tumoral en modelos de xenoinjertos pancreáticos y de colon. Tozasertib también muestra una potente actividad antitumoral cuando se infunde i.v. en ratas desnudas que portan tumores HCT116 establecidos. Una dosis más alta (2 mg/kg/h) mejora la eficacia con una disminución del 56% en el volumen tumoral medio.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:

[3]
  • Ensayos de inhibición de quinasas

    El consumo de ATP se acopla a través del par enzimático piruvato quinasa/lactato deshidrogenasa a la oxidación de NADH, que puede monitorearse mediante la disminución de la absorción a 340 nm. Las reacciones contienen 100 mM Tris (pH 8), 10 mM MgCl2, 2.2 mM ATP, 1 mM fosfoenolpiruvato, 0.6 mg/mL NADH, 75 unidades/mL piruvato quinasa, 105 unidades/mL lactato deshidrogenasa y 0.5 mM de péptido sustrato (secuencia: EAIYAAPFAKKK). Las reacciones (75 μL) se inician añadiendo suficiente quinasa para que las reacciones alcancen una concentración de quinasa de 30 nM y la disminución de la absorbancia se monitoriza durante 30 minutos a 30°C en un espectrofotómetro de microplacas. Las constantes inhibitorias se obtienen mediante la adición de 3.75 μL de Tozasertib (VX-680) en 100% DMSO o solo DMSO. Los valores de Ki se calculan de la siguiente manera: K i = IC50 / (1 + [S]/Kd), donde [S] = [ATP] = 2.2 mM, y Kd (de ATP a Abl) = 70 μM. Estos valores se calculan asumiendo un Kd (ATP) de 70 μM para el dominio quinasa Abl de tipo salvaje y H396P.
Ensayo celular:

[2]
  • Líneas celulares

    CAL-62 cells

  • Concentraciones

    5-500 nM

  • Tiempo de incubación

    4 days

  • Método

    The CAL-62 cells are cultured in the absence (dimethyl sulfoxide, DMSO) or the presence of 500  nM Tozasertib (VX-680) for different periods of time (1-5 days). The dose-dependent effects of this compound on cell proliferation are evaluated by treating the different ATC cells for 4 days with different concentrations of the Aurora inhibitor (5–500  nM). The cells are pulse labeled with 30  mM BrdU for 2  hours before the end of the incubation time. The BrdU incorporation is analyzed by means of a colorimetric immunoassay using the cell proliferation ELISA kit. The results from VX-680-treated cells are compared with those observed in control cells and expressed as a fold of variation versus control.
Estudio en animales:

[1]
  • Modelos animales

    Female athymic NCr-nu mice bearing HL-60 leukemia cells

  • Dosificaciones

    50 mg/kg, 75 mg/kg

  • Administración

    Administered via i.p.

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14981513/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18430894/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16424036/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17240048/

Validación de productos por parte del cliente

<p>Senescence induction upon PKCι depletion combined with aurora kinase inhibition. ( a) MCF7 cells were transfected as above to deplete PKCι . Two days after transfection, cells were treated for the indicated time period with 400 n M VX-680. Medium with VX-680 was then removed and fresh medium was added. Cells were stained for SA-b -gal activity 5 days after the start of transfection.* indicates a P value <0.05. ( b) MCF7 cells were treated as above. Five days after transfection, cells were fixed and assessed for the presence of gH2AX foci by immunofluorescence microscopy. (c, d) MCF7 cells were treated with dimethyl sulfoxide (DMSO) control or 400 n M VX-680 for the indicated time periods. Total cell lysates were then analyzed by western blotting for levels of p21 and GAPDH (as loading control). A representative blot is shown in panel c. Quantitation of changes in p21 levels (normalized to vehicle-treated controls) is shown in panel d. The data shown are the means ±s.e. of three independent experiments.</p>

Datos de [ Oncogene , 2012 , 31, 3584-96 ]

<p>Senescence induction upon PKCι depletion combined with aurora kinase inhibition in glioblastoma cells. (a, b) U87MG cells were transfected as above to deplete PKCι. Two days after transfection, cells were treated for 72 ( a)or24h (b) with 400 nM VX-680. Medium with VX-680 was then removed and fresh medium was added. Cells were stained for SA-b-gal activity 5 days after the start of transfection. * indicates a P value <0.05. (c) U87MG cells were treated as described in panel a above. Five days after transfection, cells were fixed and assessed for the presence of gH2AX foci by immunofluorescence microscopy. (d) U87MG cells were treated with the dimethyl sulfoxide (DMSO) control or 400 n M VX-680 for the indicated time periods. Total cell lysates were then analyzed by western blotting for levels of p21. The bar graph shows quantitation of p21 levels (normalized to vehicle-treated controls) from three independent experiments. A representative blot is also shown, with lanes aligned to correspond to the labels on the graph.</p>

Datos de [ Oncogene , 2012 , 31, 3584-96 ]

<p>MTT assay reveals a dose-dependent decrease in cell viability in mouse derived brainstem glioma cells treated with VX-680 ( P < 0.001) after 72 h of treatment. The error bars represent the standard deviation. Propidium iodide based cell sorting of mouse derived brainstem glioma cells after 72 h treatment with 5 μM reversine or 100 nM VX-680 respectively reveals increased cell populations with 4N and 8N DNA content as compared to vehicle control.</p>

Datos de [ Brain Pathol , 2012 , 23, 244-53 ]

<p>Treatment of mouse derived brainstem glioma cells for 72 h with 5 μM reversine or 100 nM VX-680 increases cell size compared with vehicle-treated control and leads to irregular-shaped nuclei and micronuclei (F–H). Images F–H represent immunofluorescent staining for GFAP (green) with DAPI counter-stain (blue) and were taken at 400 ×magnification.</p>

Datos de [ Brain Pathol , 2012 , 23, 244-53 ]

Sellecks Tozasertib (VX-680) Ha sido citado por 139 Publicaciones

A patient-derived T cell lymphoma biorepository uncovers pathogenetic mechanisms and host-related therapeutic vulnerabilities [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00102-8] PubMed: 40147445
Overcoming MET-targeted drug resistance in MET-amplified lung cancer by aurora kinase B inhibition [ Biochim Biophys Acta Mol Cell Res, 2025, 1872(7):120001] PubMed: 40499687
Hedgehog signalling is involved in acquired resistance to KRASG12C inhibitors in lung cancer cells [ Cell Death Dis, 2024, 15(1):56] PubMed: 38225225
Dynamic phosphorylation of FOXA1 by Aurora B guides post-mitotic gene reactivation [ Cell Rep, 2024, 43(9):114739] PubMed: 39276350
The molecular basis of Abelson kinase regulation by its αI-helix [ Elife, 2024, 12RP92324] PubMed: 38588001
Tozasertib activates anti-tumor immunity through decreasing regulatory T cells in melanoma [ Neoplasia, 2024, 48:100966] PubMed: 38237304
Machine learning based androgen receptor regulatory gene-related random forest survival model for precise treatment decision in prostate cancer [ Heliyon, 2024, 10(17):e37256] PubMed: 39296076
Visualization strategies to aid interpretation of high-dimensional genotoxicity data [ Environ Mol Mutagen, 2024, 10.1002/em.22604] PubMed: 38757760
Molecular landscape and functional characterization of centrosome amplification in ovarian cancer [ Nat Commun, 2023, 14(1):6505] PubMed: 37845213
Mitotic Dysregulation at Tumor Initiation Creates a Therapeutic Vulnerability to Combination Anti-Mitotic and Pro-Apoptotic Agents for MYCN-Driven Neuroblastoma [ Int J Mol Sci, 2023, 10.3390/ijms242115571] PubMed: 37958555

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