SGI-1776 free base

Además de Pim, SGI-1776 también tiene como objetivo potente FLT3 (IC50 = 44nM). El tratamiento de células de LMA con SGI-1776 resulta en una inducción de apoptosis dependiente de la concentración. Es importante destacar que SGI-1776 también es citotóxico en células primarias de LMA, independientemente del estado de mutación de FLT3 y resulta en una disminución de la proteína Mcl-1. [1]El tratamiento de células de LLC con SGI-1776 resulta en una inducción de apoptosis dependiente de la concentración. SGI-1776 induce apoptosis en LLC y el mecanismo implica la reducción de Mcl-1. Se observa una inducción de apoptosis acoplada a la inhibición de la síntesis de ARN en células de LLC tratadas con SGI-1776. [2] SGI-1776 exhibe actividad citotóxica in vitro con una IC50 relativa media de 3,1 mM. SGI-1776 induce la inhibición del crecimiento tumoral cumpliendo los criterios de actividad EFS T/C intermedia en 1 de 39 modelos evaluables. En contraste, SGI-1776 induce respuestas completas de MV4;11 subcutáneas. [3]

De acuerdo con los datos de las líneas celulares, los estudios de modelos de xenoinjertos con ratones portadores de tumores MV-4-11 muestran eficacia con SGI-1776. [1] SGI-1776 ha mostrado actividad preclínica contra modelos de líneas celulares de leucemia y tumores sólidos con valores de IC50 de 0,005–11,68 mM. SGI-1776 induce diferencias significativas en la distribución de EFS in vivo en 9 de 31 xenoinjertos de tumores sólidos y en 1 de 8 de los xenoinjertos de LLA evaluables. [3]

• Ensayos de quinasa

  La inhibición de la quinasa se mide mediante el uso de ensayos radiométricos realizados por el servicio KinaseProfiler. Los ensayos contienen un sustrato peptídico, quinasas humanas recombinantes purificadas conocidas, ATP marcado con gamma, iones de magnesio y una concentración fija (1 μM) de SGI-1776. En un volumen de reacción final de 25 μL, se incuban de 5 a 10 mU de Pim1/2/3 con 8 mM de MOPS, pH 7,0; 0,2 mM de ácido etilendiaminotetraacético; 100 μM de KKRNRTLTV; 10 mM de MgAcetato; y [γ-³²P-ATP]. La reacción se inicia con la adición de la mezcla de MgATP. Después de la incubación durante 40 minutos a temperatura ambiente, la reacción se detiene con la adición de 5 μL de una solución de ácido fosfórico al 3 %. Luego, 10 μL de la reacción se aplican en una alfombrilla de filtro P30 y se lavan 3 veces durante 5 minutos en ácido fosfórico 75 mM y una vez en metanol antes de secarse y medirse mediante un contador de centelleo.

• Líneas celulares

  MV-4-11, MOLM-13, and OCI-AML-3 cell lines

• Concentraciones

  0.1-10 μM

• Tiempo de incubación

  24 hours

• Método

  Cells are cultured in IMDM (ATCC) supplemented with 10% FBS and grown in a 37^oC incubator with 5% CO₂. Cells are routinely tested for Mycoplasma infection using a commercially available kit. Cells are treated with DMSO or various concentrations of SGI-1776 for 24 hours. Cells (1×10⁶) are washed, then resuspended in 100 μL of annexin binding buffer, mixed with 5 μL of FITC solution and 5 μL of propidium iodide (PI; 50 μg/mL) solution. For each sample, 1×10⁴ cells are measured using a Becton Dickinson FACSCalibur flow cytometer.

• Modelos animales

  Female cNOD-SCID mice

• Dosificaciones

  75 mg/kg and 200 mg/kg

• Administración

  Administered via oral gavage (PO) on a daily ×5/week or twice/week schedu