Pracinostat (SB939)

Pracinostat (SB939) tiene una selectividad 100 veces mayor para las HDAC que para las enzimas, receptores y canales iónicos no HDAC de unión a Zn. Este compuesto es un potente inhibidor de las isoenzimas HDAC de clase I, HDAC1, HDAC2, HDAC3 y HDAC8 con valores de IC50 que van de 43 nM a 140 nM. Inhibe significativamente las isoenzimas HDAC de clase II, HDAC4, HDAC5, HDAC7, HDAC9 y HDAC10 con valores de IC50 que van de 40 nM a 137 nM, con la excepción de HDAC6, que muestra un IC50 de 1008 nM. Inhibe marcadamente HDAC11 de las enzimas HDAC de clase IV con un IC50 de 93 nM, pero no muestra actividad inhibidora contra SIRT 1 de las HDAC de clase III. Este producto químico muestra una actividad antiproliferativa significativa contra una amplia variedad de líneas celulares tumorales, especialmente células de leucemia y células de linfoma cutáneo de células T con valores de IC50 que van de 50 nM (células H9) a 170 nM (células HEL92.1.7). [1]

La administración de este compuesto (25 mg/kg a 100 mg/kg) muestra una eficacia antitumoral dependiente de la dosis en un modelo murino de xenoinjerto de cáncer colorrectal humano (HCT-116). Esto es aproximadamente el doble de eficaz que SAHA: este químico causa una inhibición del crecimiento tumoral del 94 % frente al 48 % de SAHA, ambos a la dosis máxima tolerada. La administración oral de este agente a una dosis de 50 mg/kg o 75 mg/kg en el modelo genético de ratones APC^min de cáncer de colon en etapa temprana reduce notablemente el número de tumores, disminuye las puntuaciones acumuladas de hemocultivos y aumenta los valores de hematocrito de forma más eficaz. [1]

• Ensayo enzimático de HDAC

  Todas las enzimas HDAC recombinantes, con la excepción de SIRT1, se clonan y expresan en S*BIO. La mezcla de reacción que contiene 2,5 o 5 μL de la isoenzima HDAC, tampón de ensayo (25 mM Tris-HCl, pH 7,5; 137 mM NaCl; 2,7 mM KCl, 1 mM MgCl₂ y 1 mg/mL BSA), diferentes concentraciones de este compuesto y el sustrato desacetilasa fluorogénico Flour de LysTM en un volumen de reacción total de 33 μL se incuba a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añaden 16 μL de revelador Flour de LysTM y se incuban durante 10 minutos adicionales. La luz emitida se mide a 460 nm en un lector de microplacas. Los valores de IC50 se generan utilizando el software XLfit.

• Líneas celulares

  HCT116, A2780, ACHN, MCF7, HL-60, et al.

• Concentraciones

  Dissolved in DMSO (stock concentration, 10 mM), final concentrations 1.5 nM to 100 μM

• Tiempo de incubación

  96 hours

• Método

  Cells are seeded in 96-well plates in the log growth phase at a predetermined optimal density, and rested for 24 hours (adherent cells) or 2 hours (suspension cells), respectively. They are exposed to different concentrations of this compound for 96 hours. Cell proliferation assays are done using either the CyQUANT cell proliferation assay kit for adherent cells or the CellTiter96 Aqueous One solution cell proliferation kit for suspension cells.

• Modelos animales

  BALB/c nude mice bearing HCT-116 human colon cancer xenografts, Male and APC^min mice

• Dosificaciones

  25, 50, 75, or 100 mg/kg

• Administración

  Oral gavage once daily