R406

R406 es un potente inhibidor de la activación de la señalización del receptor Fc mediada por inmunoglobulina E (IgE) e IgG. Este compuesto inhibe la producción y liberación de LTC4 y citocinas y quimiocinas inducidas por anti-IgE, incluyendo TNFα, IL-8 y GM-CSF. Inhibe la fosforilación del enlazador del sustrato de Syk para la activación de células T en mastocitos y la proteína enlazadora de células B/SLP65 en células B. Este químico se une al bolsillo de unión de ATP de Syk e inhibe su actividad quinasa como un inhibidor competitivo de ATP con un K_i de 30 nM. Bloquea la activación de monocitos/macrófagos y neutrófilos mediada por FcR dependiente de Syk y la activación de linfocitos B mediada por Bcr. [1]

Este compuesto induce significativamente la apoptosis de células de leucemia linfocítica crónica (LLC) en cocultivos con células nodriza y bloquea la secreción de CCL3 y CCL4 por las células LLC en respuesta al desencadenamiento del receptor de antígeno de células B (Bcr). [2]

Es un potente inhibidor de la señalización y funciones plaquetarias iniciadas por el entrecruzamiento de FcγRIIA por anticuerpos específicos o por sueros de pacientes con HIT. [3]

R406 reduce la reacción de Arthus pasiva inversa cutánea en aproximadamente un 86% a 5 mg/kg en ratones tratados profilácticamente. Este compuesto también muestra eficacia en la inhibición de la inflamación de la pata en modelos murinos de artritis inducida por anticuerpos. [1]

No afecta negativamente la función de macrófagos o neutrófilos en las respuestas inmunitarias innatas y tiene una inmunotoxicidad funcional mínima a pesar de su efecto linfocitopénico. [4]

• Ensayo de quinasa por polarización de fluorescencia In Vitro

  R406 se diluye en serie en DMSO y luego se diluye a 1% de DMSO en tampón de quinasa (20 mM HEPES, pH 7,4, 5 mM MgCl₂, 2 mM MnCl₂, 1 mM DTT, 0,1 mg/mL BGG acetilado). ATP y sustrato en tampón de quinasa se añaden a temperatura ambiente, lo que resulta en una concentración final de DMSO del 0,2%. Las reacciones de quinasa se realizan en un volumen final de 20 mL que contiene 5 mM de sustrato peptídico HS1, 4 mM de ATP y se inician con la adición de 0,125 ng de Syk en tampón de quinasa. Se permite que la reacción proceda durante 40 minutos a temperatura ambiente. La reacción se detiene con la adición de 20 mL de mezcla de extinción de PTK que contiene EDTA/anticuerpo anti-fosfotirosina (1X final)/trazador de fosfopéptidos fluorescentes (0,5X final) diluido en tampón de dilución FP. La placa se incuba durante 30 minutos en la oscuridad a temperatura ambiente y luego se lee en un lector de placas de polarización de fluorescencia Polarion. Los datos se convierten a la cantidad de fosfopéptido presente utilizando una curva de calibración generada por competición con el competidor de fosfopéptidos proporcionado en el Kit de Ensayo de Tirosina Quinasa. Para la determinación de la IC50, este compuesto se prueba a once concentraciones y el ajuste de la curva se realiza mediante análisis de regresión no lineal.

• Modelos animales

  Arthritis is induced in C57BL/6 mice by intraperitoneal injection of 150 μL of pooled sera from adult K/BxN mice.

• Dosificaciones

  1 or 5 mg/kg

• Administración

  Administered orally