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In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.
2.15mg/ml
(10.08mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 43 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.
0.31mg/ml
(1.45mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 6.2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble. * Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes. * Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)
Preparación de soluciones madre
Actividad biológica
Descripción
PluriSIn #1 (NSC 14613) es un inhibidor de la estearoil-coA desaturasa 1 (SCD1) y es capaz de eliminar selectivamente las hPSCs.
Objetivos
SCD1
In vitro
PluriSIn #1 (NSC 14613) tiene un efecto citotóxico robusto, rápido y selectivo hacia las hPSCs, con la apoptosis como el mecanismo central de muerte celular que activa. Este compuesto conduce a estrés del RE en las hPSCs, induciendo una disminución de ~30% en la síntesis de proteínas a 20 μM. También causa una disminución de ~65% en la actividad de la estearoil-coA desaturasa (SCD1) y previene la formación de teratomas a partir de hPSCs no diferenciadas. Los PluriSIns también inhiben las mPSCs y dificultan el desarrollo embrionario del ratón.
Las células se siembran en placas de 6 pocillos a una densidad de 50k a 100k células por pocillo. 24 h después, se añaden a las células 20 μM de PluriSIn #1 (NSC 14613) o 0.2% de DMSO-control. Después de 12 h de incubación a 37 ℃, 5% CO2, se retira el medio antiguo, se lavan las células con PBS y se añade un nuevo medio que contiene 2.3 μM de 0.75 UCi [1-14C] Ácido Esteárico. Las células se incuban hasta 4 h a 37 ℃, 5% CO2. Después del período de incubación, se desecha el medio y las células se lavan 3 veces con 2 mL de PBS. Se añaden 2 mL de la mezcla n-hexano: isopropanol (3:2 v:v), y las células se incuban durante 30 min a 37 ℃, 5% CO2. Posteriormente se añaden 2 mL de solución de Folch (cloroformo: metanol, 2:1, v:v). El líquido se transfiere a tubos para la partición de fase añadiendo 1 mL de agua. La fase orgánica inferior se evapora y se utiliza para la saponificación de lípidos y la separación por TLC del ácido esteárico [1-14C] libre (sustrato) y el ácido oleico [1-14C] (producto formado). Los lípidos extraídos de las células se aplican a placas de TLC previamente sumergidas en 10% NO3 Ag y activadas a 120℃x60 min. Se añaden ácido esteárico y oleico no marcados a cada punto de aplicación como portadores y como estándares internos para la identificación. Las placas se corren con una mezcla de solventes de Cloroformo:MeOH:AcH:DDW (90:8:1:0.8). Los ácidos grasos libres se detectan por U.V. después de rociar la TLC con una solución de 2',7',diclorofluoresceína. Los puntos correspondientes al ácido esteárico y oleico se raspan y la radioactividad se cuenta en un contador de centelleo. La actividad de la desaturasa SCD1 se calcula a partir del porcentaje de conversión de sustrato a producto y la conversión a pmol/min/106 células.
Relative cell numbers for PluriSIn #1 (NSC 14613) are determined by fixating the cells with 0.5% glutardialdehyde and staining with methylene blue dissolved in 0.1 M boric acid (pH 8.5). Color extraction is performed using 0.1 M hydrochloric acid, and the staining (which is proportional to cell number) is quantitated by measuring absorbance at 650 nM.
Referencias
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23318055/
Sellecks PluriSIn #1 (NSC 14613) Ha sido citado por 3 Publicaciones
CTC-derived pancreatic cancer models serve as research tools and are suitable for precision medicine approaches
[ Cell Rep Med, 2024, 5(9):101692]
Targeting a Lipid Desaturation Enzyme, SCD1, Selectively Eliminates Colon Cancer Stem Cells through the Suppression of Wnt and NOTCH Signaling
[ Cells, 2021, 10(1)E106]
Clinical and biochemical relevance of monounsaturated fatty acid metabolism targeting strategy for cancer stem cell elimination in colon cancer.
[ Biochem Biophys Res Commun, 2019, 519(1):100-105]
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