PIK-75 HCl

N.º de catálogoS1205 Lote:S120501

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Datos técnicos

Fórmula

C16H14BrN5O4S.HCl
Peso molecular 488.74 Número CAS 372196-77-5
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 98 mg/mL (200.51 mM)
Ethanol 9 mg/mL (18.41 mM)
Water Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción El PIK-75 HCl es un inhibidor de la p110α con una CI50 de 5,8 nM (200 veces más potente que la p110β), mutantes isoespecíficos en Ser773, y también inhibe potentemente la DNA-PK con una CI50 de 2 nM en ensayos libres de células.
Objetivos
DNA-PK
(Cell-free assay)		 p110α
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 p110δ
(Cell-free assay)
2 nM 5.8 nM 76 nM 0.51 μM
In vitro PIK-75 muestra una potencia y selectividad de isoforma impresionantes en p110α, mientras que los valores de CI50 correspondientes son de 1300 nM, 76 nM y 510 nM para otras isoformas de PI3K, p110β, -γ y -δ, respectivamente. Además, cuando se une a p110α purificada, PIK-75 es un inhibidor no competitivo con respecto al ATP con una Ki de 36 nM y competitivo con respecto al sustrato PI con una Ki de 2.3 nM. PIK-75 también muestra una potente inhibición de DNA-PK. PIK-75 (1 μM) reduce la supervivencia celular al disminuir significativamente la actividad mitocondrial en células musculares lisas de las vías respiratorias (ASM) no asmáticas no estimuladas, células ASM asmáticas y fibroblastos pulmonares. Mientras que en las células ASM estimuladas con TGFβ, PIK75 solo disminuye la actividad mitocondrial en células asmáticas sin efectos en células no asmáticas. Un estudio reciente muestra que PIK-75 (10 nM) inhibe la expresión de ARNm de CD38 inducida por TNF-α y atenúa significativamente la actividad de ADP-ribosil ciclasa inducida por TNF-α en células musculares lisas de las vías respiratorias humanas.
In vivo En el modelo tumoral ErbB3WT, PIK-75 reduce la respuesta quimiotáctica in vitro a HRGβ1 y disminuye los niveles de pAkt en un 40%. Además, PIK-75 reduce significativamente la motilidad de las células tumorales y la invasión in vivo en tumores primarios ErbB3WT. En ratones machos CD1, PIK-75 provoca graves alteraciones en la prueba de tolerancia a la insulina (ITT) y la prueba de tolerancia a la glucosa (GTT), y un aumento en la producción de glucosa durante una prueba de tolerancia al piruvato (PTT).
Características Inhibidor de PI3K y DNA-PK.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:[1]
  • Ensayos de inhibición

    El inhibidor de PI3K PIK-75 se disuelve a 10 mM en dimetilsulfóxido y se almacena a -20 °C hasta su uso. La actividad enzimática de PI3K se determina en 50 μL de 20 mM HEPES, pH 7.5, y 5 mM MgCl2 que contienen 180 μM de fosfatidilinositol, iniciándose la reacción con la adición de 100 μM de ATP (que contiene 2.5 μCi de [γ-32P]ATP). Después de una incubación de 30 minutos a temperatura ambiente, la reacción enzimática se detiene con la adición de 50 μL de HCl 1 M. Los fosfolípidos se extraen luego con 100 μL de cloroformo/metanol [1:1 (v/v)] y 250 μL de KCl 2 M, seguido de un recuento por centelleo líquido. Los inhibidores se diluyen en 20% (v/v) de dimetilsulfóxido para generar una curva de concentración versus inhibición de la actividad enzimática, que luego se analiza con la versión 5.00 de Prism para Windows para calcular la CI50. Para el análisis cinético, se utiliza un ensayo luminiscente que mide el consumo de ATP. La actividad enzimática de PI3K se determina en 50 μL de 20 mM HEPES, pH 7.5, y 5 mM MgCl2 con PI y ATP en varias concentraciones. Después de una incubación de 60 minutos a temperatura ambiente, la reacción se detiene con la adición de 50 μL de Kinase-Glo, seguida de una incubación adicional de 15 minutos. La luminiscencia se lee luego usando un lector de placas Fluostar. Los resultados se analizan usando Prism.

Ensayo celular:[3]
  • Líneas celulares

    A2780, A2780/cp70, 2780AD, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3 and HS852 cells

  • Concentraciones

    0-10 μM

  • Tiempo de incubación

    48 hours

  • Método

    Mitochondrial activity is assessed after stimulation with TGFβ with or without inhibitors for 48 hours using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) assay. Harvested washed cells are resuspended in DMEM-lO% FCS and aliquoted (500 μL) into 24-well cluster plates prior to serial dilution (1:2) in duplicates. To each well, 100 μL of an appropriate MTT concentration (dissolved in PBS and filtered through a 0.2 μm filter before use to remove any blue formazan product) is added immediately after diluting the cells, which are then incubated for 3.5 hours at 37 °C. The resulting blue formazan product is solubilized overnight (16 hours) at 37 °C by the addition of 500 μL of 10% sodium dodecyl sulfate　(SDS) in 0.01 M HCl to each well. A sample (150　μL)　from each duplicate well is transferred to a 96-well　microplate, and the optical density determinedby automated spectrophotometry against a reagent blank (no　cells).　Absorbance is measured at a test wavelength of 570 nm and a reference wavelength of 690 nm. For each primary cell culture, results from three to six wells from each treatment are averaged, and data are expressed as absorbance 570 to 690 nm.
Estudio en animales:[5]
  • Modelos animales

    MTLn3 cells are injected into the right fourth mammary fat pad from the head of female severe-combined immunodeficient/NCr mice.

  • Dosificaciones

    ≤1 μM

  • Administración

    Administered via i.p.

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21778304/
  • #
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21349933/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22556157/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21725367/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22142257/

Validación de productos por parte del cliente

A549 cells were treated with DMSO or PIK-75 (200 nM) for 1 h and subsequently stimulated with izTRAIL for 24 h. Long-term survival was visualized after 7 days by crystal violet staining. One of two independent experiments is shown.

Datos de [ Cell Death Differ , 2014 , 21(3), 491-502 ]

A549 cells were treated with PIK-75 (100 nM) or SNS-032 (300 nM) for the indicated times. Cells were lysed and subjected to western blotting. One representative of two independent experiments is shown.

Datos de [ Cell Death Differ , 2014 , 21(3), 491-502 ]

DW compounds dose-dependently and persistently blocked the PI3K/mTOR signaling pathway in RH30 cells. DW09849 persistently inhibited PI3K signaling. RH30 cells treated with 0.1 uM DW09849 or PIK-75 were harvested at indicated times (0, 0.25, 0.75, 1.5, 3, 6, 12, and 24 hours). Western blot analyses were conducted to detect the indicated proteins. Data shown are representative of three independent experiments. Con, concentration.

Datos de [ J Pharmacol Exp Ther , 2014 , 348(3), 432-41 ]

<p>Knockdown of BRCA1 sensitizes cells to PI3K/AKT pathway inhibitors. MCF7 cells transfected with either BRCA1-siRNA or control-siRNA were treated with increasing amounts of inhibitors targeting the PI3K/AKT pathway for 48 h in triplicate. Viable cells were measured by MTT assay.</p>

Datos de [ Mol Carcinog , 2012 , 52, 667-75 ]

Sellecks PIK-75 HCl Ha sido citado por 46 Publicaciones

Lysosomal PIP3 revealed by genetically encoded lipid biosensors [ Proc Natl Acad Sci U S A, 2025, 122(13):e2426929122] PubMed: 40127277
The mevalonate pathway contributes to breast primary tumorigenesis and lung metastasis [ Mol Oncol, 2024, 10.1002/1878-0261.13716] PubMed: 39119789
PIK Your Poison: The Effects of Combining PI3K and CDK Inhibitors against Metastatic Cutaneous Squamous Cell Carcinoma In Vitro [ Cancers (Basel), 2024, 16(2)370] PubMed: 38254859
Pharmacological Targeting of Androgen Receptor Elicits Context-Specific Effects in Estrogen Receptor-Positive Breast Cancer [ Cancer Res, 2023, 83(3):456-470] PubMed: 36469363
MDM2 antagonists promote CRISPR/Cas9-mediated precise genome editing in sheep primary cells [ Mol Ther Nucleic Acids, 2023, 31:309-323] PubMed: 36726409
Reciprocal regulation of Daxx and PIK3CA promotes colorectal cancer cell growth [ Cell Mol Life Sci, 2022, 79(7):367] PubMed: 35718818
The Lectin LecB Induces Patches with Basolateral Characteristics at the Apical Membrane to Promote Pseudomonas aeruginosa Host Cell Invasion [ mBio, 2022, 13(3):e0081922] PubMed: 35491830
PIK-75 overcomes venetoclax resistance via blocking PI3K-AKT signaling and MCL-1 expression in mantle cell lymphoma [ Am J Cancer Res, 2022, 12(3):1102-1115] PubMed: 35411248
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575] PubMed: 35326726
Isthmin-1 is an adipokine that promotes glucose uptake and improves glucose tolerance and hepatic steatosis [ Cell Metab, 2021, S1550-4131(21)00326-0] PubMed: 34348115

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