NVP-ADW742

NVP-ADW742 exhibe una selectividad 6 veces mayor para IGF-1R frente a InsR con una IC50 de 2,8 μM; actividad inhibitoria mínima contra c-Kit, HER1, PDGFR, VEGFR2 o Bcr-Abl p210 con una IC50 superior a 5 μM. Este compuesto inhibe significativamente la proliferación celular estimulada por suero en una variedad de líneas celulares tumorales de manera dosis-dependiente, con valores de IC50 de 0,1-0,5 μM para las líneas celulares de mieloma múltiple (MM), y los efectos antitumorales en las células MM no pueden ser superados por el cocultivo con BMSCs. También anula la respuesta de las células tumorales a la IL-6 en presencia de suero. Además, este químico es activo contra líneas celulares de MM con resistencia a agentes anticancerosos convencionales (quimioterapia citotóxica) o en investigación (CC-5013, TRAIL/Apo2L, PS-341), así como contra células tumorales primarias de pacientes con MM con enfermedad multidrogorresistente. Este compuesto disminuye la producción de VEGF por las células tumorales y las células estromales de la médula ósea, y suprime la secreción de VEGF inducida por IGF-1 por varios tipos de tumores, como las células de cáncer de tiroides o las células de MM. La inhibición de IGF-1R por este compuesto (0,75 μM) sensibiliza las células de MM o las células de cáncer de próstata a otros agentes anticancerosos como la doxorrubicina, TRAIL/Apo2L o PS-341. [1]

La administración de NVP-ADW742 a 10 mg/kg dos veces al día inhibe significativamente el crecimiento tumoral, prolonga la supervivencia y mejora el efecto antitumoral de la quimioterapia citotóxica en el modelo murino de MM difuso. [1]

• Ensayo de actividad de quinasa celular

  El valor de la IC50 para el efecto de NVP-ADW742 sobre la autofosforilación de IGF-1R se determina a nivel celular en presencia de concentraciones crecientes de este compuesto, utilizando ensayos de “Capture ELISAs” en placas de 96 pocillos. Brevemente, las células NWT-21 se siembran en placas de cultivo de tejidos de 96 pocillos en medio de crecimiento completo y se cultivan hasta una confluencia del 70-80%, y luego se les priva de suero durante 24 horas en medio con 0,5% de FCS. Posteriormente, las células se incuban durante 90 minutos en presencia de este inhibidor, seguido de la estimulación con IGF-I (10 ng/mL) durante 10 minutos a 37 °C. Posteriormente, las células se lavan dos veces con PBS helado y se lisan a 4 °C con 50 μL/pocillo de tampón RIPA (50 mM Tris-HCl, pH 7,2, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, 6 mM EGTA, 1% NP-40, 20 mM NaF, 1 mM benzamidina, 15 mM pirofosfato de sodio, 1 mM PMSF y 0,5 mM Na₃VO₄). Los lisados de cada experimento se transfieren luego a placas ELISA negras pre-recubiertas con anticuerpos de captura específicos para IGF-1R. Después de la captura por los anticuerpos, los lisados se mezclan con 40 μL de un anticuerpo anti-fosfotirosina marcado con fosfatasa alcalina (AP) (PY20(AP) diluido a 0,2 μg/mL en tampón RIPA, y se incuban durante la noche a 4 °C. Después de lavar (PBST) e incubar durante 45 minutos a temperatura ambiente con el sustrato luminiscente de AP CDPStar RTU con Emerald II (90 μL/pocillo), la luminiscencia se mide utilizando un contador de centelleo Packard Top Count.

• Líneas celulares

  MM-1S, MM-1R, RPMI-8226/S, OPM-1, OCI-My5, SKMM2, KMS-12-BM, XG-1, L363, S6B45 cells and et al.

• Concentraciones

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~ 10 μM

• Tiempo de incubación

  48 hours

• Método

  Cells are exposed to various concentrations of NVP-ADW742 for 48 hours in the presence or absence of serum. Cell survival is examined using MTT assay.

• Modelos animales

  Male SCID/NOD mice injected i.v. with MM-1S-Luc⁺ human MM cells

• Dosificaciones

  10 mg/kg twice daily

• Administración

  Injection i.p. or oral gavage