NVP-ADW742

NVP-ADW742 exhibits a 6-fold greater selectivity for IGF-1R versus InsR with IC50 of 2.8 μM; minimal inhibitory activity against c-Kit, HER1, PDGFR, VEGFR2, or Bcr-Abl p210 with IC50 greater than 5 μM. This compound significantly inhibits the serum-stimulated cell proliferation in a variety of tumor cell lines in dose-dependent manner, with IC50 values of 0.1-0.5 μM for the multiple myeloma (MM) cell lines, and the antitumor effects on MM cells can not be overcome by the co-culture with BMSCs. It also abrogates the responsiveness of tumor cells to IL-6 in the presence of serum. In addition, this chemical is active against MM cell lines with resistance to conventional (cytotoxic chemotherapy) or investigational (CC-5013, TRAIL/Apo2L, PS-341) anticancer agents, as well as primary tumor cells from MM patients with multi-drug-resistant disease. This compound decreases the production of VEGF by tumor cells and bone marrow stromal cells, and suppresses the IGF-1-induced secretion of VEGF by various tumor types such as thyroid cancer cells or MM cells. IGF-1R inhibition by this compound (0.75 μM) sensitizes MM cells or prostate cancer cells to other anticancer agents such as doxorubicin, TRAIL/Apo2L, or PS-341. [1]

Administration of NVP-ADW742 at 10 mg/kg twice daily significantly inhibits tumor growth, prolongs survival, and enhances the antitumor effect of cytotoxic chemotherapy in the mice model of diffuse MM. [1]

• Ensayo de actividad de quinasa celular

  El valor de la IC50 para el efecto de NVP-ADW742 sobre la autofosforilación de IGF-1R se determina a nivel celular en presencia de concentraciones crecientes de este compuesto, utilizando ensayos de “Capture ELISAs” en placas de 96 pocillos. Brevemente, las células NWT-21 se siembran en placas de cultivo de tejidos de 96 pocillos en medio de crecimiento completo y se cultivan hasta una confluencia del 70-80%, y luego se les priva de suero durante 24 horas en medio con 0,5% de FCS. Posteriormente, las células se incuban durante 90 minutos en presencia de este inhibidor, seguido de la estimulación con IGF-I (10 ng/mL) durante 10 minutos a 37 °C. Posteriormente, las células se lavan dos veces con PBS helado y se lisan a 4 °C con 50 μL/pocillo de tampón RIPA (50 mM Tris-HCl, pH 7,2, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, 6 mM EGTA, 1% NP-40, 20 mM NaF, 1 mM benzamidina, 15 mM pirofosfato de sodio, 1 mM PMSF y 0,5 mM Na₃VO₄). Los lisados de cada experimento se transfieren luego a placas ELISA negras pre-recubiertas con anticuerpos de captura específicos para IGF-1R. Después de la captura por los anticuerpos, los lisados se mezclan con 40 μL de un anticuerpo anti-fosfotirosina marcado con fosfatasa alcalina (AP) (PY20(AP) diluido a 0,2 μg/mL en tampón RIPA, y se incuban durante la noche a 4 °C. Después de lavar (PBST) e incubar durante 45 minutos a temperatura ambiente con el sustrato luminiscente de AP CDPStar RTU con Emerald II (90 μL/pocillo), la luminiscencia se mide utilizando un contador de centelleo Packard Top Count.

• Líneas celulares

  MM-1S, MM-1R, RPMI-8226/S, OPM-1, OCI-My5, SKMM2, KMS-12-BM, XG-1, L363, S6B45 cells and et al.

• Concentraciones

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~ 10 μM

• Tiempo de incubación

  48 hours

• Método

  Cells are exposed to various concentrations of NVP-ADW742 for 48 hours in the presence or absence of serum. Cell survival is examined using MTT assay.

• Modelos animales

  Male SCID/NOD mice injected i.v. with MM-1S-Luc⁺ human MM cells

• Dosificaciones

  10 mg/kg twice daily

• Administración

  Injection i.p. or oral gavage