Mubritinib (TAK 165)

Mubritinib (TAK 165) muestra una selectividad > 4000 veces mayor sobre otras tirosina quinasas, como EGFR, FGFR, PDGFR, Jak1, Src y Blk. Incluso a una baja concentración de 0,1 μM, bloquea significativamente la fosforilación de HER2, lo que lleva a la regulación a la baja de la vía PI3K-Akt y MAPK en la línea celular BT474 con un alto nivel de HER2. Este compuesto no solo exhibe un efecto antiproliferativo altamente potente en la línea celular de cáncer BT474 que sobreexpresa ErbB2 con una IC50 de 5 nM, sino que también muestra efectos antiproliferativos marcados en líneas celulares con HER2 expresado débilmente con una IC50 de 53 nM, 90 nM y 91 nM para LNCaP, LN-REC4 y T24, respectivamente. No muestra actividades inhibidoras contra células PC-3 con HER2 expresado muy débilmente con una IC50 de 4,62 μM, así como líneas celulares HT1376 y ACHN que sobreexpresan EGFR con una IC50 de >25 μM. [1]

Mubritinib (TAK 165) inhibe significativamente el xenoinjerto LN-REC4 con una relación de volumen tumoral tratamiento/control del 26,5 %. Aunque ineficaz para inhibir el crecimiento de las células UMUC-3 y ACHN in vitro (IC50 de 1,812 y >25 μM, respectivamente), la administración oral de este compuesto (10 o 20 mg/kg por día) inhibe significativamente el crecimiento de los xenoinjertos UMUC-3 y ACHN con una relación de volumen tumoral tratamiento/control del 22,9 % y 26 %, respectivamente, en comparación con 20 mg/kg, que es ineficaz para el crecimiento tumoral de UMUC-3. [1]

• Inhibición de la actividad tirosina quinasa de HER2/erbB2

  Las células BT-474 se siembran en placas de 24 pocillos y se cultivan durante la noche. Luego se agrega Mubritinib (TAK 165) en varias concentraciones. Después de una incubación de 2 horas, las células se recolectan directamente en un tampón de muestra de dodecilsulfato de sodio (SDS) (200 μL). Las alícuotas que contienen cantidades iguales de extracto celular total se corren en una electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS (PAGE) con gradiente del 7,5% al 15%. Después de la electroforesis, las proteínas se transfieren a una membrana de fluoruro de polivinilideno (PVDF) para el análisis de Western blot utilizando un anticuerpo primario relevante. La detección de proteínas se logra mediante un método de detección de quimioluminiscencia mejorada (ECL). El grado de fosforilación de tirosina de HER2/erbB2 se mide con el analizador de imágenes luminosas LAS-1000 plus. La concentración de este compuesto que inhibe la fosforilación de HER2/erbB2 en un 50% (IC50) se calcula a partir de una curva dosis-respuesta generada por regresión lineal de mínimos cuadrados de la respuesta utilizando el software SAS.

• Líneas celulares

  BT474, HT1376, UMUC-3, T24, ACHN, DU-145, PC-3, LN-REC4, and LNCaP cells

• Concentraciones

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~50 mM

• Tiempo de incubación

  72 hours

• Método

  Mubritinib (TAK 165) is added at various concentrations after cells are seeded into 6-well plates and cultured overnight, and the cells are treated continuously for 72 hours. After the incubation period, cells are counted for the measurement of antiproliferative activity.

• Modelos animales

  Athymic nude mice (BALB/c nu/nμ) and SCID mice (C.B.-17 Scid/Scid) are implanted subcutaneously with UMUC-3, LN-REC4 or ACHN cells

• Dosificaciones

  10 or 20 mg/kg/day

• Administración

  Orally twice daily