Quisinostat (JNJ-26481585) Dihydrochloride

JNJ-26481585 exhibe una actividad antiproliferativa de amplio espectro en líneas celulares de cánceres sólidos y hematológicos, como todas las líneas celulares de tumores de pulmón, mama, colon, próstata, cerebro y ovario, con IC50 que oscilan entre 3,1 y 246 nM, lo que es más potente que R306465, CRA-24781 o mocetinostat en varias líneas celulares de cáncer humano probadas. [1] Un estudio reciente muestra que JNJ-26481585 promueve la muerte de las células de mieloma a bajas concentraciones nanomolares, lo que resulta en la depleción de Mcl-1 y la inducción de Hsp72. [2]

En un modelo de cribado de tumores ováricos A2780 sensible a HDAC1, la administración de JNJ-26481585 a su dosis máxima tolerada (10 mg/kg i.p. y 40 mg/kg p.o.) durante 3 días conduce a una fluorescencia regulada por HDAC1, lo que predice la inhibición del crecimiento tumoral. Además, JNJ-26481585 también muestra efectos inhibidores más potentes sobre el crecimiento de las metástasis hepáticas colorrectales C170HM2. [1]

• Ensayos de actividad de HDAC

  En todos los casos, las proteínas HDAC de longitud completa se expresan utilizando células Sf9 infectadas con baculovirus. Además, HDAC3 se coexpresa como un complejo con NCOR2 humana. Para evaluar la actividad de los complejos celulares que contienen HDAC1, los complejos HDAC1 inmunoprecipitados se incuban con un fragmento de péptido de histona H4 marcado con [³H]acetilo [biotina-(6-aminohexanoico)Gly-Ala-(acetil[3H])Lys-Arg-His-Arg-Lys-Val-NH2] en un volumen total de 50 μL de tampón de ensayo enzimático (25 mM HEPES (pH 7.4), 1 M sacarosa, 0.1 mg/mL BSA y 0.01 % (v/v) Triton X-100). La incubación se realiza durante 45 minutos a 37 °C (inmunoprecipitados) o 30 minutos a temperatura ambiente. Antes de la adición del sustrato, los inhibidores de HDAC se añaden a concentraciones crecientes y se preincuban durante 10 minutos a temperatura ambiente. Después de la incubación, la reacción se interrumpe con 35 μL de tampón de parada (1 M HCl y 0.4 M ácido acético). El ácido [³H]acético liberado se extrae con 800 μL de acetato de etilo y se cuantifica por recuento de centelleo. Se inmunoprecipitan cantidades iguales de HDAC1 como se indica por análisis Western blot. Los resultados de actividad de HDAC1 se presentan como la media ± DE de tres experimentos independientes en un único lisado.

• Líneas celulares

  NCL-H2106, Colo699 and LNCAP cells

• Concentraciones

  0-300 nM

• Tiempo de incubación

  24 hours

• Método

  All cell lines are obtained from American Type Culture Collection and cultured according to instructions. The effect of HDAC inhibitors on cell proliferation is measured using an MTT. Proliferation of non–small cell lung carcinoma (NSCLC) cell lines is assessed using an Alamar Blue–based assay. For proliferation of hematologic cell lines, cells are incubated for 72 hours and the cytotoxic activity is evaluated by MTS assay. Data are presented as mean IC50 or IC40 ± SD of at least three independent experiments.

• Modelos animales

  HCT116 human colon carcinoma cells are injected s.c. into the inguinal region of athymic male NMRI nu/nu mice, C170HM2 cell suspensions are injected into the peritoneal cavity of male MFI nude mice.

• Dosificaciones

  ≤10 mg/kg

• Administración

  Administered via both p.o. and i.p.