Idarubicin HCl

Idarubicin tiene una actividad citotóxica significativa contra esferoides multicelulares, comparable a los efectos antiproliferativos en células monocapa. [1] Idarubicin inhibe el CYP450 2D6.[2] Idarubicin es aproximadamente 57,5 veces y 25 veces más activa que la doxorrubicina y la epirrubicina, respectivamente. Idarubicin es capaz de superar la resistencia a múltiples fármacos mediada por la P-glicoproteína. [3] Idarubicin inhibe la formación de radicales superóxido de PMN. [4] Idarubicin podría acoplarse a los anticuerpos monoclonales (anti-Ly-2.1, anti-L3T4 o anti-Thy-1) con retención de la solubilidad proteica y la actividad de los anticuerpos. [5] Idarubicin inhibe la proliferación de células NALM-6 con una IC50 de 12 nM. [6]

La reducción de Idarubicin depende de las cetonas reductasas y procede de manera más estereoselectiva que la de la mayoría de las cetonas, dando lugar casi exclusivamente al epímero (13S). La alta estereoselectividad en la reducción de Idarubicin podría resultar de la inducción quiral debido a la presencia de centros asimétricos cerca del grupo carbonilo en Idarubicin. [7]

• Experimentos de metabolismo de CYP450

  La evaluación del metabolismo de Idarubicin por las isoenzimas del CYP450 3A4, 2D6, 2C8, 2C9 y 1A2 se completa utilizando proteínas CYP450 humanas aisladas para cada isoforma. Para estas evaluaciones se utiliza el método de prueba de inhibición de P450 de alto rendimiento. Los experimentos de metabolismo están diseñados para investigar las siguientes propiedades de cada fármaco: (1) si Idarubicin es un sustrato de las isoenzimas CYP450 3A4, 2C8, 2C9, 1A2 o 2D6; (2) si el metabolismo se ve afectado por inhibidores conocidos de cada isoenzima; (3) si Idarubicin es inhibidor de las isoenzimas CYP450; y (4) si la caspofungina o el itraconazol inhiben el metabolismo del CYP450 de Idarubicin. La dibenzilfluoresceína (DBF) (CYP3A4, CYP2C8, CYP2C9), la 3-ciano-7-etoxicumarina (Cyp1A2) y la 7-metoxi-4-(aminometil)-cumarina (MAMC) (CYP2D6) son los sustratos conocidos utilizados como controles para confirmar la actividad de la isoenzima respectiva y evaluar los efectos de Idarubicin sobre la actividad de la isoenzima. Además, el ketoconazol, la quercetina, el suflapenazol, la furafilina y la quinidina se utilizan como inhibidores de control del CYP450 para las isoenzimas 3A4, 2C8, 2C9, 1A2 o 2D6, respectivamente. El sustrato, el inhibidor más Idarubicin, según se indique, se añaden a cada muestra de proteína y se incuban durante 20 a 60 minutos, según lo recomendado por el fabricante, a 37 °C. Las reacciones se detienen con una solución de solvente orgánico y luego las muestras se analizan mediante un lector de placas de fluorescencia según corresponda. Para cada experimento, se preparan muestras de control con una cantidad conocida de sustrato y metabolito sintetizado, en ausencia de la isoenzima, para comparaciones cualitativas. Todos los experimentos se realizan por triplicado.

• Líneas celulares

  NALM-6 cells

• Concentraciones

  0.1 nM-10 μM

• Tiempo de incubación

  24 hours

• Método

  The anti-proliferative activity of the Idarubicin in the conjugate is compared to that of free drug by measuring the inhibition of [³H]thymidine uptake. Briefly, NALM-6 cells (1.5 × 10⁶/mL) are added to a flat-bottomed microtitre plate (100 μL/well) and incubated for 1 hours at 37ºC. Free Idarubicin and Idarubicin-mAb conjugates are sterilised by filtration and diluted in sterile PBS; various concentrations are added to the wells (100 μL/well) in duplicate and the plates are incubated at 37ºC, 7% CO₂ for 24 hours. Following incubation, 50 μL medium containing 1 μCi [³H]thymidine is added to each well and the plates are incubated for a further 4 hours. Cells are harvested onto glass-fibre filter-paper, dried and counted in a scintillation counter. Specificity studies are performed using the same technique where the ability of Idarubicin-anti-CD19 conjugates to kill CD19 + cells is compared to the cytotoxicity of irrelevant Idarubicin-JGT conjugates. NALM-6 cells (1.5× 10⁶/mL, 300 μL tube) are incubated for 30 rain on ice with various concentrations of Idarubicin-anti-CD 19 or Idarubicin-JGT conjugates. Following three washes in ice-cold RPMI-1640 medium (4 mL/wash), the cells are resuspended in fresh medium and transferred to 96-well plates (100 μL/well). Each tube is set up in duplicate and two wells are plated out per tube (a total of 4 wells per drug concentration). Cells are pulsed with [³H]thymidine 24 hours later and harvested.

• Modelos animales

  Rat, rabbit, mouse, dog

• Dosificaciones

  2 mg/kg, 0 mg/kg -75 mg/kg, 3 mg/kg and 0 mg/kg -75 mg/kg

• Administración

  Administered via i.v.