FTY720 (Fingolimod) Hydrochloride

El efecto inhibidor del S1P es revertido por diversas concentraciones de FTY720, con un efecto IC50 de 173 nM. Además, el FTY720 (10 nM) por sí solo no ejerce ningún efecto sobre la expresión de moléculas coestimuladoras. El FTY720 revierte el aumento de la expresión de HLA-I inducido por S1P tanto para los porcentajes de células como para el MFI, al comparar el efecto del S1P con el efecto de la combinación de S1P con FTY720. [1] Las dosis medias y altas de FTY720-P también aumentan los niveles de TGF-β1. La expresión de ARNm de TGF-β1 y Foxp3 se regula al alza en el grupo de FTY720-P de dosis alta. La proliferación de las células T efectoras se suprime significativamente en el grupo de FTY720-P de dosis media y alta con una relación de células Treg/Teff de 1:1. Con una relación de 1:1, la proliferación de las células T efectoras también se suprime en el grupo de FTY720 de dosis alta. [2]

El FTY720 es eficaz en los xenoinjertos de LLA Ph⁺ pero no en los Ph^- utilizando un modelo de enfermedad temprana. El FTY720 produce una reducción significativa de la carga de la enfermedad en los xenoinjertos de LLA Ph⁺ utilizando un modelo de enfermedad temprana. Los xenoinjertos humanos de LLA Ph⁺ responden al FTY720 con una reducción del 80 % de la enfermedad general si el tratamiento se ha iniciado de forma temprana. En contraste, el tratamiento de ratones con FTY720 no da como resultado una reducción de la leucemia en comparación con los controles utilizando cuatro xenoinjertos humanos de LLA Ph^- separados. [3]

• Líneas celulares

  Immature DCs

• Concentraciones

  10 nM

• Tiempo de incubación

  4 hours

• Método

  Immature DCs are left intact or are incubated with 2 μM S1P, 10 nM FTY720, 10 nM SEW2871 or the combinations of S1P with these drugs for 4 hours. As a control 1 μg/mL LPS is used. The cells are washed and incubated in a 96-well plate (v-bottom, 2 × 10⁵ cells per well), washed again and resuspended in PBS buffer containing 0.1% sodium azide. They are labeled with 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD80, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD83, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD86, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-class I, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-DR, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-E, or 1 μg/mL FITC-conjugated mouse IgG as a control. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control FITC-conjugated mouse IgG. To stain NK cells with antibodies for various NK cell activating receptors, they are either left untreated or incubated with 2 μM S1P for 4 hours, washed and stained with 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp30 (CD337), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp44 (CD336), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKG2D (CD314), or as a control 1 μg/mL PE-conjugated mouse IgG1, for 45 min at 4 °C. NK cells are also stained with 1 μg/mL FITC-conjugated anti-killer inhibitory receptor (KIR)/CD158 antibody which recognizes KIR2DL2, KIR2DL3, KIR2DS2 and KIR2DS4, and as a control with FITC-conjugated mouse IgG. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control PE-conjugated or FITC-conjugated mouse IgG.

• Modelos animales

  NOD/SCIDγc^−/− mice bearing ALL cells.

• Dosificaciones

  5 mg/kg/day, 10 mg/kg/day

• Administración

  Administered via i.p.