CUDC-101

Específico para las HDAC de clase I y clase II, CUDC-101 no inhibe las HDAC de tipo Sir de clase III. Este compuesto muestra una actividad débil contra otras proteínas quinasas, incluyendo KDR/VEGFR2, Lyn, Lck, Abl-1, FGFR-2, Flt-3 y Ret con IC50 de 0.85 μM, 0.84 μM, 5.91 μM, 2.89 μM, 3.43 μM, 1.5 μM y 3.2 μM, respectivamente. Muestra una amplia actividad antiproliferativa en muchos tipos de células cancerosas humanas con IC50 de 0.04-0.80 μM, exhibiendo una mayor potencia y combinaciones de vorinostat en la mayoría de los casos. Este químico inhibe potentemente las líneas celulares cancerosas. [1] Inhibe la mutante T790M de EGFR resistente aunque sus efectos son incompletos con un Amax de ~60% de la actividad enzimática máxima después de la inhibición. El tratamiento con este compuesto aumenta la acetilación de las histonas H3 y H4, así como la acetilación de sustratos no histonas de HDAC como p53 y α-tubulina, de manera dosis-dependiente en varias líneas celulares cancerosas. También suprime la expresión de HER3, la amplificación de Met y la reactivación de AKT en células tumorales. [2]

La administración de CUDC-101 a 120 mg/kg/día induce la regresión tumoral en el modelo de cáncer de hígado Hep-G2, que es más eficaz a su dosis máxima tolerada (25 mg/kg/día) y vorinostat a una dosis de concentración equimolar (72 mg/kg/día). Este compuesto inhibe el crecimiento de xenoinjertos de CPNM H358 sensibles de manera dosis-dependiente. También muestra una potente inhibición del crecimiento tumoral en el modelo de xenoinjerto de CPNM A549 resistente. Este químico produce una regresión tumoral significativa en el modelo de cáncer de mama MDA-MB-468 resistente, HER2-negativo, con sobreexpresión de EGFR y el modelo de carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC) CAL-27 con sobreexpresión de EGFR. Además, inhibe el crecimiento tumoral en los modelos de cáncer colorrectal HCT116 mutante K-ras y de cáncer de páncreas HPAC con expresión de EGFR/HER2 (neu). [1]

• Ensayos de inhibición de HDAC, EGFR y HER2

  Las actividades de las HDAC de Clase I y II se evalúan utilizando el sistema Biomol Color de Lys. En resumen, los extractos nucleares de células HeLa se utilizan como fuente de HDAC. Se añaden diferentes concentraciones de CUDC-101 a los extractos nucleares de células HeLa en presencia de un sustrato artificial colorimétrico. Se añade revelador al final del ensayo y la actividad enzimática se mide en el lector de microplacas Wallac Victor II 1420 a 405 nM. La actividad quinasa de EGFR y HER2 se mide utilizando los kits de ensayo de quinasa HTScan EGF receptor y HER2. En resumen, la proteína de fusión GST-EGFR se incuba con un péptido sustrato biotinilado sintético y varias concentraciones de este compuesto en presencia de 400 mM de ATP. El sustrato fosforilado se captura con placas de 96 pocillos recubiertas de estreptavidina. El nivel de fosforilación se monitoriza mediante anticuerpos secundarios anti-fosfotirosina y marcados con europio. La solución de mejora se añade al final del ensayo y la actividad enzimática se mide en el lector de microplacas Wallac Victor II 1420 a 615 nM.

• Líneas celulares

  HCC827, H358, H460, HepG2, Hep3B2, Sk-Hep-1, Capan1, BxPc3, MCF-7, MDA-MB-231, and Sk-Br-3

• Concentraciones

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Tiempo de incubación

  72 hours

• Método

  Cancer cell lines are plated at 5000 to 10000 cells per well in 96-well flatbottomed plates with varying concentrations of CUDC-101. The cells are incubated with this compound for 72 hours in the presence of 0.5% of fetal bovine serum. Growth inhibition is assessed by an adenosine triphosphate (ATP) content assay using the Perkin-Elmer ATPlite kit. Apoptosis is routinely assessed by measuring the activities of Caspase-3 and -7 using Apo-ONE Homogeneous Assay Kit.

• Modelos animales

  Female athymic mice (nude nu/nu CD-1) inoculated with Hep-G2, H358, A549, MDA-MB468, HCT116, CAL-27, HepG2, or HPAC

• Dosificaciones

  ~120 mg/kg/day

• Administración

  Administered via i.v.