BIX 02189

N.º de catálogoS1531 Lote:S153102

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Datos técnicos

Fórmula

C₂₇H₂₈N₄O₂

Peso molecular

440.54

Número CAS

1094614-85-3

Solubilidad (25°C)*

In vitro

Ethanol

80 mg/mL (181.59 mM)

DMSO

60 mg/mL (136.19 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción

BIX02189 es un inhibidor selectivo de MEK5 con una IC50 de 1,5 nM, también inhibe la actividad catalítica de ERK5 con una IC50 de 59 nM en ensayos sin células, y no inhibe las quinasas estrechamente relacionadas MEK1, MEK2, ERK2 y JNK2.

Objetivos

MEK5 (Cell-free assay)	ERK5 (Cell-free assay)
1.5 nM	59 nM

In vitro

BIX02189 bloquea la actividad catalítica de MEK5 y ERK5 con valores de IC50 de 1,5 nM y 59 nM, respectivamente. Son más potentes que el efecto causado por BIX02188 con valores de IC50 de 4,3 nM y 810 nM, respectivamente. BIX02189 muestra actividad inhibidora contra CSF1R (FMS) con una IC50 de 46 nM, pero no muestra actividad contra las quinasas relacionadas MEK1, MEK2, ERK1, p38α, JNK2, EGFR y STK16 con valores de IC50 > 3,7 μM. El pretratamiento con BIX02189 inhibe la fosforilación de ERK5 inducida por sorbitol en células HeLa de manera dosis-dependiente y no muestra actividad inhibidora contra la fosforilación de ERK1/2, p38 y JNK1/2 MAPK. El tratamiento solo con BIX02189 durante 24 horas en células HeLa o HEK293 no muestra ningún efecto citotóxico. BIX02189 inhibe la expresión de luciferasa impulsada por MEK5/ERK5/MEF2C en células HeLa y HEK293 con valores de IC50 de 0,53 μM y 0,26 μM, respectivamente. Esto es más significativo que el efecto causado por BIX02188. BIX02189 inhibe la activación de ERK5 y suprime la ubiquitinación de p53 mediada por la proteína de interacción con el extremo C del Hsc70 (CHIP), lo que lleva a la inversión del efecto protector causado por el flujo laminar (flujo L) en células endoteliales de vena umbilical humana (HUVEC) expuestas a 15d-PGJ2. BIX02189 (10 uM) inhibe la fosforilación de ERK5 y reduce la actividad transcripcional del factor potenciador de miocitos 2 (MEF2) en cardiomiocitos de rata neonatos (NRCM) estimulados por isoproterenol. BIX02189 mejora la apoptosis inducida por sorbitol en NRCM, confirmando el papel protector de ERK5 en los cardiomiocitos.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:^{^[1]}	Ensayo catalítico La proteína MEK5 aislada del sistema de expresión de baculovirus se utiliza para medir la actividad quinasa utilizando el reactivo de detección de ATP PKLight. El ensayo se realiza utilizando 15 nM de GST-MEK5 y 0,75 μM de ATP en tampón de ensayo que consiste en 25 mM Hepes, pH 7,5, 10 mM MgCl₂, 50 mM KCl, 0,2 % BSA, 0,01 % CHAPS, 100 μM Na₃VO₄, 0,5 mM DTT y 1 % DMSO en presencia de concentraciones variables de BIX02189. La mezcla de reacción de la quinasa se incuba durante 90 minutos a temperatura ambiente, seguida de la adición de 10 μL de reactivo de detección de ATP durante 15 minutos. La señal de unidades de luz relativa (RLU) se mide y las señales de RLU se convierten en valores de porcentaje de control (POC) para la determinación del valor de IC50.
Ensayo celular:^{^[1]}	Líneas celulares HeLa cells Concentraciones Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM Tiempo de incubación Pretreatment for 1.5 hours Método The cells are serum starved for 20 hours prior to stimulation with sorbitol at a final concentration of 0.4 M for 20 minutes at 37 °C. BIX02189 is added 1.5 hours prior to the addition of sorbitol. The cells are harvested and lysed in 50 μL RIPA buffer containing Halt protease and phosphate inhibitors at 4 °C for 5-10 minutes. The lysates are centrifuged for 10 minutes at 14,000 rpm and 50 μL lysate is added to 50 μl 2× sample buffer and boiled for 4 minutes at 95 °C. Twenty microliters sample is run on SDS–PAGE 10% Tris-glycine gels and transferred to nitrocellulose. Western blotting is done with appropriate antibodies.

Ensayo de quinasa:^{^[1]}

Ensayo catalítico
La proteína MEK5 aislada del sistema de expresión de baculovirus se utiliza para medir la actividad quinasa utilizando el reactivo de detección de ATP PKLight. El ensayo se realiza utilizando 15 nM de GST-MEK5 y 0,75 μM de ATP en tampón de ensayo que consiste en 25 mM Hepes, pH 7,5, 10 mM MgCl₂, 50 mM KCl, 0,2 % BSA, 0,01 % CHAPS, 100 μM Na₃VO₄, 0,5 mM DTT y 1 % DMSO en presencia de concentraciones variables de BIX02189. La mezcla de reacción de la quinasa se incuba durante 90 minutos a temperatura ambiente, seguida de la adición de 10 μL de reactivo de detección de ATP durante 15 minutos. La señal de unidades de luz relativa (RLU) se mide y las señales de RLU se convierten en valores de porcentaje de control (POC) para la determinación del valor de IC50.

Ensayo celular:^{^[1]}

Líneas celulares
HeLa cells
Concentraciones
Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM
Tiempo de incubación
Pretreatment for 1.5 hours
Método
The cells are serum starved for 20 hours prior to stimulation with sorbitol at a final concentration of 0.4 M for 20 minutes at 37 °C. BIX02189 is added 1.5 hours prior to the addition of sorbitol. The cells are harvested and lysed in 50 μL RIPA buffer containing Halt protease and phosphate inhibitors at 4 °C for 5-10 minutes. The lysates are centrifuged for 10 minutes at 14,000 rpm and 50 μL lysate is added to 50 μl 2× sample buffer and boiled for 4 minutes at 95 °C. Twenty microliters sample is run on SDS–PAGE 10% Tris-glycine gels and transferred to nitrocellulose. Western blotting is done with appropriate antibodies.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18834865/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22254155/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20075332/

Validación de productos por parte del cliente

$<p>Expression of iNOS, Fra-1, Fra-2, JunB, JunD, and FosB in PMN. (A) PMN were treated with or without SB203580 (40 μM), BIX02189 (30 μM), or SP600125 (40 μM) for 1 h before addition of NDMA (0.74 μg/μl). The cytoplasmic and nuclear fractions obtained from the cells were used to detect iNOS, Fra-1, Fra-2, JunB, JunD, and FosB protein levels by Western blot. The results shown are representative of five independent experiments.</p>$: Datos de [ J Immunotoxicol , 2013 , 10, 32-39 ]

: Datos de [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

: Datos de [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

: Datos de [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

Sellecks BIX 02189 Ha sido citado por 75 Publicaciones

Integrated drug response prediction models pinpoint repurposed drugs with effectiveness against rhabdomyosarcoma [ PLoS One, 2024, 19(1):e0295629]	PubMed: 38277404
Protective effects of macrophage-specific integrin α5 in myocardial infarction are associated with accentuated angiogenesis [ Nat Commun, 2023, 10.1038/s41467-023-43369-x]	PubMed: 37985764
Etiopathogenic role of ERK5 signaling in sarcoma: prognostic and therapeutic implications [ Exp Mol Med, 2023, 55(6):1247-1257]	PubMed: 37332046
The WNK1-ERK5 route plays a pathophysiological role in ovarian cancer and limits therapeutic efficacy of trametinib [ Clin Transl Med, 2023, 13(4):e1217]	PubMed: 37029785
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 14(11):715]	PubMed: 37919293
Extracellular signal-Regulated Kinase 5 (ERK5) is required for the Yes-associated protein (YAP) co-transcriptional activity [ Cell Death Dis, 2023, 14(1):32]	PubMed: 36650140
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 10.1038/s41419-023-06229-6]	PubMed: 37919293
Neuregulin modulates hormone receptor levels in breast cancer through concerted action on multiple signaling pathways [ Clin Sci (Lond), 2023, 137(1):1-15]	PubMed: 36511917
Impact of Liver Inflammation on Bile Acid Side Chain Shortening and Amidation [ Cells, 2022, 11(24)3983]	PubMed: 36552746
Glucose Starvation or Pyruvate Dehydrogenase Activation Induce a Broad, ERK5-Mediated, Metabolic Remodeling Leading to Fatty Acid Oxidation [ Cells, 2022, 11(9)1392]	PubMed: 35563698

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