Abiraterone Acetate

Abiraterone muestra una buena complejación con el hierro hemo solo en SM1. [1] Abiraterone bloquea la síntesis de andrógenos al inhibir el CYP17A1. Abiraterone también bloquea la 3β-hidroxiesteroide deshidrogenasa (3βHSD), una enzima que es absolutamente necesaria para la síntesis de andrógenos biológicamente activos. Abiraterone inhibe la conversión de DHEA a Δ⁴-androstenediona. La inhibición de la 3βHSD por Abiraterone bloquea la síntesis de DHT y la respuesta del receptor de andrógenos. Abiraterone inhibe la conversión de Δ⁵-androstenediol a testosterona. [2] Abiraterone inhibe la C_17,20-liasa, con una IC50 de 5.8 nM, en microsomas de testículo de rata. Abiraterone inhibe significativamente la secreción de testosterona (−48%) y, a su vez, aumenta la concentración de LH (192%). [3] Abiraterone inhibe la proliferación in vitro y la expresión génica regulada por AR de células de cáncer de próstata AR-positivas, lo que podría explicarse por el antagonismo de AR además de la inhibición de la esteroidogénesis. [4]

Después de la administración intraperitoneal en un modelo de roedor, se encontró que Abiraterone tenía una desacetilación rápida. Cuando se administró como su profármaco de acetato (CB 7630), suprimió la testosterona circulante a niveles indetectables y disminuyó marcadamente el peso de los órganos sensibles a los andrógenos. Abiraterone es bien tolerado y la vida media de eliminación media de Abiraterone en estos estudios fue de 27,6 h (lo que apoya el uso de una dosis una vez al día)[5]. Estudios preclínicos con Abiraterone demostraron una reducción en la producción de andrógenos río abajo de CYP17 que resultó en una disminución del peso de la próstata ventral, los testículos y las vesículas seminales en ratones[6].

• Ensayo de actividad de C_17,20-liasa

  Los microsomas se diluyen a una concentración final de proteína de 50 μg/mL en la mezcla de reacción que contiene 0,25 M de sacarosa, 20 mM de Tris-HCl (pH 7,4), 10 mM de G6P y 1,2 UI/mL de G6PDH. Después de la equilibración a 37 °C durante 10 minutos, la reacción se inicia mediante la adición de βNADP para obtener una concentración final de 0,6 mM. Antes de la distribución de 600 μL de la mezcla de reacción en cada tubo, los compuestos de prueba se evaporan a sequedad bajo una corriente de nitrógeno y luego se incuban a 37 °C durante 10 minutos. Después de la incubación con Abiraterone, 500 μL de la mezcla de reacción se transfieren a tubos que contienen 1 μM del sustrato enzimático, 17OHP. Después de otros 10 minutos de incubación, los tubos se colocan en hielo y la reacción se detiene mediante la adición de 0,1 ml de NaOH 1N. Los tubos se congelan y se almacenan a -20 °C hasta que se analicen los niveles de Δ4A. Se desarrolla y automatiza un RIA de Δ4A en formato de microplaca en nuestro laboratorio utilizando un anticuerpo específico contra Δ4A e instrucciones proporcionadas por Biogenesis. La separación del antígeno libre y unido se logra con una suspensión de carbón recubierto de dextrano. Después de la centrifugación, las alícuotas del sobrenadante claro se cuentan por duplicado en un contador de centelleo líquido. Las concentraciones de Δ4A de muestras desconocidas se determinan a partir de la curva estándar. El límite de detección es de 0,5 ng/mL y los coeficientes de variación intra-ensayo e inter-ensayo son del 10,7 y 17,6%, respectivamente, a un valor de ensayo de 13 ng/mL. La velocidad de la reacción enzimática se expresa como pmol de Δ4A formado por cada 10 minutos y por cada mg de proteína. El valor de la actividad máxima sin inhibidor (control) se establece en el 100%. Los valores de IC50 se calculan mediante análisis no lineal a partir del gráfico de la actividad enzimática (%) frente al logaritmo de la concentración del inhibidor.

• Líneas celulares

  LNCaP and VCaP cells

• Concentraciones

  0 μM -10 μM

• Tiempo de incubación

  24 hours and 96 hours

• Método

  LNCaP and VCaP cells are seeded in 96-well plates and grown in CSS-supplemented phenol red-free or FBS-supplemented media for 7 days. Cells are treated with Abiraterone at 24 hours and 96 hours after plating and cell viability is determined on day 7 by adding CellTiter Glo and measuring luminescence.

• Modelos animales

  Male NOD/SCID mice with LAPC4 cells

• Dosificaciones

  0.5 mmol/kg/d

• Administración

  Administered via s.c.