AEE788 (NVP-AEE788)

N.º de catálogoS1486 Lote:S148601

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Datos técnicos

Fórmula

C27H32N6
Peso molecular 440.58 Número CAS 497839-62-0
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 88 mg/mL (199.73 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción AEE788 (NVP-AEE788) es un potente inhibidor de EGFR y HER2/ErbB2 con IC50 de 2 nM y 6 nM, respectivamente. Es menos potente contra VEGFR2/KDR, c-Abl, c-Src y Flt-1, y no inhibe Ins-R, IGF-1R, PKCα o CDK1. Este compuesto ha alcanzado los ensayos clínicos de fase 1/2.
Objetivos
EGFR
(Cell-free assay)		 HER2/ErbB2
(Cell-free assay)		 c-Abl
(Cell-free assay)		 FLT1
(Cell-free assay)		 c-Fms
(Cell-free assay)		 Ver más
2 nM 6 nM 52 nM 59 nM 60 nM
In vitro AEE788 (NVP-AEE788) también inhibe KDR, c-abl, c-Src y Flt-1 con IC50 de 50-80 nM. No es sensible a ErbB-4, PDGFR-β, Flt-3, Flt-4, RET y c-Kit y no tiene efecto inhibidor sobre Ins-R, IGF-1R, PKC-α y PKA. Este compuesto inhibe potentemente la fosforilación de EGFR en células A431 con una IC50 de 11 nM. También inhibe la fosforilación de KDR en células CHO y erbB2 en células BT-474, sin ningún efecto sobre la fosforilación inducida por PDGF en células A31. Inhibe la proliferación de células NCI-H596, MK, BT-474 y SK-BR-3 con IC50 de 78, 56, 49 y 381 nM, respectivamente. Además, tiene la propiedad adicional de inhibir la proliferación celular impulsada por el mutante de EGFR, incluidos 32D/EGFR y 32D/EGFRvIII. Además, también inhibe la proliferación de HUVEC impulsada tanto por EGF como por VEGF con IC50 de 43 y 155 nM, respectivamente. Inhibe la fosforilación de EGFR, VEGFR2, Akt y MAPK en líneas celulares de carcinoma de células escamosas cutáneo humano (células Colo16, HaCaT, SRB1 y SRB12), lo que conduce a la inhibición del crecimiento y la inducción de apoptosis. Inhibe la fosforilación de EGFR y Akt en células HT29 a 0,2 a 1,0 μM. Inhibe la proliferación celular y previene la activación de HER1, HER2 y HER3 inducida por EGF y neurregulina en líneas celulares de meduloblastoma. Muestra actividades supresoras del crecimiento en células de meduloblastoma quimiosensibles y quimiorresistentes.
In vivo AEE788 (NVP-AEE788) produce una inhibición dosis-dependiente del crecimiento tumoral en modelos de xenoinjerto NCI-H596 o DU145, con solo cambios menores en el peso corporal. Induce la regresión tumoral en un 57% a 50 mg/kg en el modelo NeuT/erbB2 GeMag e inhibe potentemente la fosforilación de EGFR inducida por EGF en tumores A431 y la fosforilación de erbB2 en tumores GeMag. Este compuesto inhibió la angiogénesis inducida por VEGF de forma dosis-dependiente y no inhibe la angiogénesis inducida por bFGF. Suprime el crecimiento del volumen tumoral en un 54% en xenoinjertos Colo16 a 50 mg/kg, lo que se debe a la inhibición de la fosforilación de EGFR, VEGFR, Akt y MAPK. A 50 mg/kg, también inhibe el crecimiento de tumores en el ciego y el peritoneo (>50%) y reduce la incidencia de metástasis en los ganglios linfáticos al 70% en células HT29 implantadas en el ciego de ratones nude, sin pérdida de peso corporal y evidencia macroscópica de neovascularización. Reduce significativamente los niveles de expresión de pEGFR y pVEGFR en tumores cecales HT29 y no altera los de EGF, VEGF, EGFR o VEGFR. Combinado con CPT-11, da como resultado tumores significativamente más pequeños y una inhibición completa de la metástasis en los ganglios linfáticos. Este compuesto inhibe el crecimiento de xenoinjertos Daoy, DaoyPt y DaoyHER2 en un 51%, 45% y 72%, respectivamente. Podría promover la generación de especies reactivas de oxígeno mediada por LBH589 en células tumorales K562, lo que a su vez aumenta la apoptosis.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:[1]
  • Ensayos de Protein Kinase

    Los ensayos de Protein Tyrosine Kinase in vitro para AEE788 (NVP-AEE788) se realizan en placas de 96 pocillos (30 μL) a temperatura ambiente durante 15–45 min utilizando los dominios quinasa recombinantes fusionados a glutatión S-transferasa (4-100 ng, dependiendo de la actividad específica). El [γ33P]ATP se utiliza como donante de fosfato y el péptido polyGluTyr-(4:1) como aceptor. Con la excepción de la Protein Kinase C-α, la ciclina-dependiente quinasa 1/cycB y la Protein Kinase A, el sulfato de protamina (200 μg/mL), la histona H1 (100 μg/mL) y el heptapéptido Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly (conocido como Kemptide Bachem) se utilizan respectivamente como sustratos peptídicos. Los ensayos se optimizan para cada quinasa utilizando las siguientes concentraciones de ATP: 1,0 μM (c-Kit, c-Met, c-Fms, c-Raf-1 y RET), 2,0 μM (EGFR, erbB2, ErbB3 y ErbB4), 5,0 μM (c-abl), 8,0 μM (Flt-1, Flt-3, Flt-4, Flk, KDR, FGFR-1 y Tek), 10,0 μM (PDGFR-β, Protein Kinase C-α y ciclina-dependiente quinasa 1) y 20,0 μM (c-Src y Protein Kinase A). La reacción se termina con la adición de 20 μL de EDTA 125 mM. Treinta μL (c-abl, c-Src, receptor del factor de crecimiento 1 similar a la insulina, RET-Men2A y RET-Men2B) o 40 μL (todas las demás quinasas) de la mezcla de reacción se transfieren a una membrana de difluoruro de polivinilideno-Inmobilon, pre-remojada con 0,5% H3PO4 y montada en un colector de vacío. Luego se aplica el vacío y cada pocillo se enjuaga con 200 μL de H3PO4 al 0,5%. Las membranas se retiran y se lavan cuatro veces con H3PO4 al 1,0% y una vez con etanol. Las membranas secas se cuentan después de montarlas en un marco Packard TopCount de 96 pocillos y con la adición de 10 μL/pocillo de Microscint. Los valores de IC50 (±SE) se calculan mediante análisis de regresión lineal del porcentaje de inhibición y son promedios de al menos tres determinaciones.
Ensayo celular:[1]
  • Líneas celulares

    T24, BT-474, SK-BR-3, and NCI-H596 cells

  • Concentraciones

    ~10 μM

  • Tiempo de incubación

    4 or 6 days

  • Método

    Methylene Blue Cell Proliferation Assay. Cells are seeded at 1.5 × 103 cells/well into 96-well microtiter plates and incubated overnight at 37 °C, 5% v/v CO2 and 80% relative humidity. On day 1, dilutions of AEE788 (NVP-AEE788) are added, with the highest concentration being 10 μM. After incubation of the cell plates for an additional 4 (T24) or 6 (BT-474, SK-BR-3, and NCI-H596) days, cells are fixed with 3.3% v/v glutaraldehyde, washed with water, and stained with 0.05% w/v methylene blue. After washing, the dye is eluted with 3% HCl and the absorbance measured at 665 nm with a SpectraMax 340 spectrophotometer. IC50 values are determined by mathematical curve-fitting and are defined as the drug concentration leading to 50% inhibition of net cell mass increase compared with untreated control cultures.
Estudio en animales:[1]
  • Modelos animales

    NCI-H596, DU145, A431, B16 and oncogenic NeuT-transfected HC11 cells in female BALB/c nu/nu (nude) mice

  • Dosificaciones

    50 mg/kg

  • Administración

    Dosed orally

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15256466/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15756022/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15867367/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20885895/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17317822/

Validación de productos por parte del cliente

<p>EGFR-SGLT1 interaction is irresponsive to modulators of EGFR’s tyrosine kinase. A: Immunoprecipitation coupled Western blot analysis ofinteractionsbetween EGFR-HA and SGLT1-FlaginHEK293 cells treatedwith EGF or AEE788. EGFR, total EGFR; pEGFR, phosphorylated EGFR; IP, immunoprecipitation; IB, immunoblot. Input, expression levels of indicated exogenous proteinsin HEK293 whole celllysates used for the IP.</p>

, , The Prostate, 2013, 73:1453-1461.

Representative images of mitochondria of PC3 cells treated with DMSO, EGF (20 ng/ml) AEE788 (a small molecular EGFR inhibitor at 6 μM) or AEE788+EGF for 24 h. Mitochondria were stained with Mitotracker Red and images were taken with a confocal microscope.

Datos de [ , , Cell Cycle, 2014, 13(15):2415-30 ]

Sellecks AEE788 (NVP-AEE788) Ha sido citado por 13 Publicaciones

A community challenge for a pancancer drug mechanism of action inference from perturbational profile data [ Cell Rep Med, 2022, 3(1):100492] PubMed: 35106508
Comprehensive pharmacogenomic characterization of gastric cancer. [ Genome Med, 2020, 18;12(1):17] PubMed: 32070411
Targeting the non-canonical roles of PCNA modifies and increases the response to targeted anti-cancer therapy [ Oncotarget, 2019, 10(68):7185-7197] PubMed: 31921382
Rationale for Using Irreversible Epidermal Growth Factor Receptor Inhibitors in Combination with Phosphatidylinositol 3-Kinase Inhibitors for Advanced Head and Neck Squamous Cell Carcinoma. [ Mol Pharmacol, 2019, 95(5):528-536] PubMed: 30858165
Targeted reduction of the EGFR protein, but not inhibition of its kinase activity, induces mitophagy and death of cancer cells through activation of mTORC2 and Akt. [ Oncogenesis, 2018, 7(1):5] PubMed: 29358623
Synergistic induction of apoptosis by salinomycin and gefitinib through lysosomal and mitochondrial dependent pathway overcomes gefitinib resistance in colorectal cancer. [ Oncotarget, 2017, 8(14):22414-22432] PubMed: 26461472
A high-content EMT screen identifies multiple receptor tyrosine kinase inhibitors with activity on TGFβ receptor [ Oncotarget, 2016, 7(18-:25983-6002] PubMed: 27036020
[ Oncotarget, 2015, ] PubMed: 25965827
[ Oncotarget, 2015, ] PubMed: 26378037
Phosphorylation of Mutationally Introduced Tyrosine in the Activation Loop of HER3 Confers Gain-of-Function Activity [Hu Z, et al. PLoS One, 2015, 10(4):e0123623] PubMed: 25853726

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