(2-Hydroxypropyl)-β-cyclodextrin (HP-β-CD)

Las moléculas de HP-β-CD no solo no fueron tóxicas para las células, sino que también inhibieron en gran medida la fibrilación de Aβ y redujeron la toxicidad inducida por Aβ de manera dependiente de la concentración. Concentraciones demasiado bajas de HP-β-CD causaron interacciones insuficientes con Aβ, mientras que concentraciones demasiado altas de HP-β-CD causaron que el HP-β-CD se autoagregara en especies inactivas. El HP-β-CD interactuó preferentemente con algunos de los residuos hidrofóbicos de Aβ, lo que impidió que los oligómeros de Aβ crecieran aún más en fibrillas maduras a través de la elongación de péptidos y la asociación lateral[1].

El HP-β-CD, debido a su excelente biocompatibilidad, ha sido ampliamente utilizado en sistemas de administración de fármacos, remediación ambiental, aditivos alimentarios y farmacoterapia. El HP-β-CD puede cruzar fácilmente la BBB y dirigirse a las células nerviosas[1]. El HP-β-CD es bien tolerado en las especies animales probadas (ratas, ratones y perros), particularmente cuando se administra por vía oral, y muestra una toxicidad limitada. Después de una dosis intravenosa única de 200 mg/kg en ratas y perros, el 14C-HP-β-CD se eliminó rápidamente (más del 90% en 4 h), casi completamente como el compuesto intacto y principalmente por excreción renal. La excreción en heces y aire exhalado fue mínima. La vida media de eliminación plasmática fue de 0.4 h en ratas y 0.8 h en perros. Después de la administración oral de HP-β-CD tanto en ratas como en perros, el 86% se excretó a través de las heces en ambas especies, mientras que menos del 5% se excretó en la orina. La biodisponibilidad absoluta se estimó en un 3.3% en el perro y menos en la rata. Tanto en ratas como en perros, después de la administración intravenosa, la distribución tisular fue limitada: en ratas, la concentración más alta se encontró en el riñón y el pulmón y en perros, las concentraciones más altas se encontraron en el riñón y el hígado. Los niveles plasmáticos de HP-β-CD sin cambios disminuyeron rápidamente y mostraron una disminución bifásica después de una dosis intravenosa y oral única en voluntarios sanos. La utilidad de un vehículo de dosificación acuoso de HP-β-CD al 45% p/v en estudios preclínicos es muy común. Este vehículo es útil con fármacos poco solubles en agua[2].

• Líneas celulares

  SH-SY5Y cell line

• Concentraciones

  25, 50, 125, and 250 μM

• Tiempo de incubación

  24 and 48 h

• Método

  Cells that was cultured at 37 ℃ in the mixture of sterile-filtered Eagle's minimum essential medium and Ham's F-12 medium mixed at a 1 : 1 ratio with 10% fetal bovine serum, 1% penicillin/streptomycin and humidified air with 5% CO2 was employed as a model neuron. Cells were cultured to confluence and harvested using 0.25 mg/mL trypsin/EDTA solution. Before adding Aβ1-42 and HP-β-CD, cells were resuspended in Opti-MEM reduced serum medium and counted using a hemocytometer. Cells were then plated in a 96-well tissue culture plate with approximately 100 000 cells per well in 200 μL medium. To determine the cell viability, colorimetric MTT metabolic activity assay was performed. SH-SY5Y cells were cultured in a 96-well plate at 37 1C. Then, Aβ1-42, HP-β-CD and Aβ1-42-HP-β-CD solutions were individually added to the cultured cells, which were then continually cultured for additional 24 h and 48 h. After removing the supernatant of each well, 20 μL of MTT solution (5 mg/mL in PBS) and 100 mL of medium were then added into the systems. After incubation for another 4 h, the formazan crystals were dissolved in dimethyl sulfoxide (150 μL) and the absorbance intensity was measured using a microplate reader at 570 nm.