(-)-Dizocilpine (MK 801) Maleate

Estudios neurofisiológicos in vitro, utilizando una preparación de rebanadas corticales de rata, demuestran una acción antagonista potente, selectiva y no competitiva de la dizocilpina sobre las respuestas despolarizantes a N-Me-D-Asp pero no al cainato o quisqualato. Las potencias de SKF 10047 y los enantiómeros de dizocilpina como antagonistas de N-Me-D-Asp se correlacionan estrechamente (r = 0,99) con sus potencias como inhibidores de la unión de [3H] dizocilpina. Esto sugiere que los sitios de unión de dizocilpina están asociados con los receptores N-Me-D-Asp y proporciona una explicación para el mecanismo de acción de dizocilpina como anticonvulsivo. [1]

Todas las ratas control presentan déficits neurológicos permanentes graves después de una lesión isquémica de la médula espinal (ISCI), mientras que las ratas tratadas con dizocilpina tienen un resultado neurológico estadísticamente (P < 0,05) mejor y una buena recuperación. La histopatología revela una necrosis neuronal grave en la sustancia gris lumbar de las ratas control, mientras que las ratas tratadas con dizocilpina muestran una lesión leve. Estos resultados demuestran que una dosis única de dizocilpina administrada antes de la ISCI proporciona una neuroprotección significativa. [3]

• Ensayos de unión in vitro

  Para los ensayos de unión in vitro, las cortezas cerebrales de ratas Sprague-Dawley macho (200-300 g) se homogeneizan en 9 volúmenes de sacarosa helada mediante nueve golpes con un homogeneizador de teflón/vidrio a 500 rpm. El homogeneizado se centrifuga durante 10 min a 1000 x g, y el sobrenadante se recentrifuga a 10.000 x g durante 20 min a 4 ℃. El pellet se suspende en tampón de ensayo y se incuba durante 20 min antes de la centrifugación final a 10.000 x g durante 20 min a 4 ℃. El pellet se resuspende en tampón de ensayo (70 ml por gramo de tejido original). La unión de [3H] dizocilpina se mide incubando alícuotas duplicadas de 750 ul de esta suspensión de membrana cruda (=0,75 mg de proteína) con 100 ul de tampón que contiene desplazador o de tampón solo (unión total), 100 ul de 50 nM [3H] dizocilpina y 50 ul de tampón durante 60 min a 23 ℃. La unión inespecífica se define por la dizocilpina no marcada. La incubación se termina mediante filtración rápida a través de filtros Whatman GF/B, que se lavan inmediatamente con dos porciones de 5 ml de tampón de ensayo helado en un cosechador de células Brandel M 24-R. El tiempo requerido para el procedimiento completo de filtración y lavado es inferior a 10 segundos. La radioactividad en los filtros se determina mediante recuento por centelleo líquido en viales estándar con 10 ml de Hydrofluor con una eficiencia de recuento del 41 %.

• Líneas celulares

  mixed neuronal/glial cell cultures

• Concentraciones

  10 μM

• Tiempo de incubación

  30 minutes

• Método

  Primary mixed neuronal/glial cultures are prepared from fetal rat brains. Mature cultures are exposed to dissolved dizocilpine (10 μM), and NMDA (0 or 3 μM) at 37 ℃ for 30 minutes. Apoptosis is assessed using terminal-deoxy-nucleotidyl end-nick labeling oligonucleosomal DNA fragmentation enzyme-linked immunosorbent assay, and caspases-3 and -9 activation assays.

• Modelos animales

  ischemic spinal cord injury medel

• Dosificaciones

  1 mg/kg

• Administración

  IV