Home PI3K/Akt/mTOR mTOR inhibitor WYE-125132 (WYE-132)

solo para uso en investigación

WYE-125132 (WYE-132) mTOR inhibitor

Cat. No.: S2661

WYE-125132 (WYE-132) is a highly potent, ATP-competitive mTOR inhibitor with IC50 of 0.19 nM; it is highly selective for mTOR versus PI3Ks or PI3K-related kinases hSMG1 and ATR.
WYE-125132 (WYE-132) mTOR inhibitor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 519.6

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: S266101 DMSO]104 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false Pureza: 100.00%
100.00

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Líneas celulares Tipo de ensayo Concentración Tiempo de incubación Formulación Descripción de la actividad PMID
LNCAP cells Cytotoxicity assay Cytotoxicity against human LNCAP cells, IC50=0.002 μM
Haga clic para ver más datos experimentales de líneas celulares

Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 519.6 Fórmula

C27H33N7O4

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 1144068-46-1 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos N/A Smiles CNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(C=NN3C4CCC5(CC4)OCCO5)C(=N2)N6CC7CCC(C6)O7

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

DMSO : 104 mg/mL (200.15 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Características
A highly potent, ATP-competitive, and specific mTOR kinase inhibitor.
Targets/IC50/Ki
mTOR
(Cell-free assay)
0.19 nM
In vitro
WYE-125132 (WYE-132) potently and ATP-competitively inhibits recombinant mTOR kinase with IC50 of 0.19 nM and also shows high selectivity over various PI3Ks and a panel of 230 protein kinases. In vitro, it exhibits significant anti-proliferative activity against a panel of tumor cell lines with IC50 ranging from 2 nM (LNCap) to 380 nM (HTC116). Besides, this compound also causes cell cycle progression, induction of apoptosis, and inhibition of protein synthesis and cell size. It results in a significant reduction in the synthesis of pre-tRNALeu by 72%, 80%, and 53% in actively proliferating cells of MG63, MDA361, and HEK293, respectively by inhibiting mTORC1. Moreover, WYE-125132 is also found to induce the dephosphorylation of Maf1 (negative regulator of Pol III transcription) and its accumulation in the nucleus.
Ensayo de quinasa
Ensayos de quinasa
Los ensayos enzimáticos de mTOR mediante inmunoensayo fluorescente de lantánidos mejorado por disociación (DELFIA), ensayos matriciales de ATP y ensayos de quinasa de inmunocomplejos de mTOR se realizan de la siguiente manera para WYE-125132 (WYE-132). El TOR endógeno del lisado de células LNCap se inmunoprecipita con anti-FRAP/TOR (N-19). El lisado celular (1,0 mg) se mezcla con 4 μg de anticuerpo acoplado a agarosa de proteína-G/A en 1 mL de tampón de lisis. Los inmunocomplejos se lavan secuencialmente con tampón de lisis, tampón de lisis más 500 mM KCl y tampón de lavado de quinasa. Los inmunocomplejos se someten a una reacción de quinasa durante 30 minutos a 30 °C en un volumen final de 50 μL que contiene 10 mM Hepes (pH 7,4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glicerofosfato y 0,5 μM microcistina LR, 1 mM DTT, 10 mM MnCl2, 100 μM ATP, 1 μg His6-S6K o 1 μg His6-4EBP1. Las reacciones de quinasa (enzimas en inmunocomplejo y purificadas) se terminan con tampón de muestra NuPAGE LDS y se resuelven en un gel NuPAGE Bis-Tris al 4-12% para Western blotting con anti-P(T389)-p70S6K y anti-P(T46)-4EBP1, anti-FRAP/TOR (N-19), anti-FLAG M2 y anti-His6 (Clon His-1). En el ensayo radiactivo, se utilizan 10 μCi [γ-32P]ATP (3000 Ci/mmol) y 100 μM de ATP frío. Los productos marcados con 32P se resuelven mediante SDS-PAGE y se someten a autorradiografía en películas de rayos X Kodak.
In vivo
WYE-125132 (WYE-132) (5 mg/kg p.o.) produces significant antitumor activity and causes dose-dependent tumor growth delay in the PI3K/mTOR- and HER2-hyperactive MDA361 tumor model. In addition, it also shows potent antitumor efficacy in the PTEN-null glioma U87MG, non-small cell lung cancer H1975 and A549 models.
Referencias

Preguntas frecuentes (Frequently Asked Questions)

Pregunta 1:
Whether the vehicle “30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol” you recommended for it is a clear solution or not? What’s the suggested formula for i.p. injection?

Respuesta:
The formula on our website “30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol” is not a clear solution and can be used for p.o. administration. For i.p. solution, there are two methods to prepare it: 1）2% DMSO+30% PEG 300+ddH2O, 2.5mg/ml, stable for 1h at RT; 2）2% DMSO+30% PEG 300+ 2% Tween80 +ddH2O, 2.5mg/ml, stable for 2h at RT.