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GSK1070916 Aurora Kinase inhibitor

Cat. No.: S2740

GSK1070916 is a reversible and ATP-competitive inhibitor of Aurora B/C with IC50 of 3.5 nM/6.5 nM. It displays >100-fold selectivity against the closely related Aurora A-TPX2 complex. Phase 1.
GSK1070916 Aurora Kinase inhibitor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 507.63

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: Pureza: 99.79%
99.79

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Líneas celulares Tipo de ensayo Concentración Tiempo de incubación Formulación Descripción de la actividad PMID
A549 cells Proliferation assay 6-7 d Antiproliferative activity against human A549 cells after 6 to 7 days by celltiter-glo luminescence assay in absence of 70% human serum albumin, EC50=0.007 μM
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Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 507.63 Fórmula

C30H33N7O

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 942918-07-2 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos N/A Smiles CCN1C=C(C(=N1)C2=CC=C(C=C2)NC(=O)N(C)C)C3=C4C=C(NC4=NC=C3)C5=CC=CC(=C5)CN(C)C

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

DMSO : 102 mg/mL (200.93 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 102 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Aurora B-INCENP
(Cell-free assay)
3.5 nM
Aurora C-INCENP
(Cell-free assay)
6.5 nM
FLT1
(Cell-free assay)
42 nM
Tie-2
(Cell-free assay)
59 nM
SIK
(Cell-free assay)
70 nM
FLT4
(Cell-free assay)
74 nM
FGFR1
(Cell-free assay)
76 nM
In vitro
GSK1070916 selectively inhibits Aurora B and Aurora C with Ki of 0.38 nM and 1.5 nM over Aurora A with Ki of 490 nM. Inhibition of Aurora B and Aurora C by this compound is time-dependent, with an enzyme-inhibitor dissociation half-life of >480 min and 270 min respectively. In addition, it is also a competitive inhibitor with respect to ATP. Human tumor cells treated with this inhibitor shows dose-dependent inhibition of phosphorylation on serine 10 of Histone H3, a substrate specific for Aurora B. Moreover, it inhibits the proliferation of tumor cells with EC50 values of <10 nM in over 100 cell lines spanning a broad range of tumor types, with a median EC50 of 8 nM. Although this compound has potent activity against proliferating cells, a dramatic shift in potency is observed in primary, nondividing, normal human vein endothelial cells. Furthermore, cells treated with this agent do not arrest in mitosis but instead fails to divide and become polyploid, ultimately leading to apoptosis. In another study, it is also reported high chromosome number associated with resistance to the inhibition of Aurora B and C suggests cells with a mechanism to bypass the high ploidy checkpoint are resistant to this chemical.
Ensayo de quinasa
Ensayo de Quinasa
La capacidad de GSK1070916 para inhibir las enzimas Aurora se mide utilizando ensayos de quinasa in vivo. Los ensayos miden la capacidad de Aurora A, Aurora B y Aurora C para fosforilar un sustrato peptídico sintético. Se utiliza Biotin-Ahx-RARRRLSFFFFAKKK-NH2 para el ensayo Aurora A–TPX2 LEADseekerTM y 5FAM-PKAtide para el ensayo IMAPTM para las tres quinasas Aurora. Para tener en cuenta la inhibición tiempo-dependiente de las enzimas Aurora, Aurora A–TPX2, Aurora B–INCENP y Aurora C–INCENP se incuban con este compuesto a varias concentraciones durante 30 min antes de que las reacciones se inicien con la adición de sustratos. Para el ensayo Aurora A LEADseekerTM, las condiciones finales del ensayo son 0,5 nM Aurora A–TPX2, 1 μM de sustrato peptídico, 6 mM de MgCl2, 1,5 μM de ATP, 0,003 μCi/μL de [γ-33P] ATP en 50 mM de Hepes, pH 7,2, 0,15 mg/mL de BSA, 0,01 % de Tween-20, 5 mM de DTT y 25 mM de KCl. Las reacciones se incuban a temperatura ambiente (25 °C) durante 120 min y se terminan con la adición de perlas LEADseekerTM en PBS que contiene EDTA (concentración final de 2 mg/mL de perlas y 25 mM de EDTA). Las placas se sellan y las perlas se dejan decantar durante la noche. La formación del producto se cuantifica utilizando un Viewlux Imager. Para los ensayos IMAPTM, Aurora A–TPX2 (concentración final 1 nM), Aurora B–INCENP (concentración final 2 nM) o Aurora C–INCENP (concentración final 2,5 nM) se añade a las placas que contienen el compuesto en 5 μL de tampón (25 mM Hepes, pH 7,2, para Aurora A, 25 mM Hepes, pH 7,5, para Aurora B y 20 mM Hepes, pH 7,2, para Aurora C) que contiene 0,15 mg/mL de BSA, 0,01 % de Tween 20 y 25 mM de NaCl. Esta mezcla se incuba a temperatura ambiente durante 30 min. Para iniciar la reacción, se añaden 5 μL de una solución de sustrato que contiene el mismo tampón Hepes utilizado para la preincubación, 25 mM de NaCl, MgCl2 (2, 4 y 4 mM para Aurora A, B y C respectivamente), DTT (4, 4 y 2 mM para Aurora A, B y C respectivamente), ATP (4, 4 y 10 μM para Aurora A, B y C respectivamente), 200 nM de 5FAM-PKAtide, 0,01 % de Tween 20 y 0,15 mg/mL de BSA. Las reacciones se incuban a temperatura ambiente durante 120 min para Aurora A y B y 60 min para Aurora C. Estas reacciones se terminan con la adición de 10 μL de 1:500 (1:600 para Aurora C) de reactivo de unión progresiva en 95% de tampón de unión progresiva A y 5% de tampón de unión progresiva B. Las placas se incuban a temperatura ambiente durante aproximadamente 90–120 min (tiempo permitido para que se alcance el equilibrio). Las placas se leen en un lector de placas Molecular Devices Analyst en modo de polarización de fluorescencia.
In vivo
GSK1070916 (25, 50, or 100 mg/kg) shows dose-dependent inhibition of phosphorylation of an Aurora B–specific substrate in mice and consistent with its broad cellular activity, this compound has antitumor effects in 10 human tumor xenograft models including breast, colon, lung, and two leukemia models.
Referencias