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solo para uso en investigación

Disodium (R)-2-Hydroxyglutarate activador de ROS

Cat. No.S7873

Disodium (R)-2-Hydroxyglutarate (disodio de ácido D-α-hidroxiglutárico) es un inhibidor competitivo de dioxygenasas dependientes de α-cetoglutarato con una Ki de 10,87 ± 1,85 mM.
Disodium (R)-2-Hydroxyglutarate ROS Activador Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 192.08

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: Pureza: 99.74%
99.74

Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 192.08 Fórmula

C5H6Na2O5

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 103404-90-6 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos D-α-Hydroxyglutaric acid disodium Smiles C(CC(=O)[O-])C(C(=O)[O-])O.[Na+].[Na+]

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

Water : 38 mg/mL

DMSO : Insoluble
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
α-ketoglutarate-dependent dioxygenase
In vitro
En células U-87MG, (R)-2-Hydroxyglutarate actúa como un débil antagonista de α-KG para inhibir las histonas desmetilasas dependientes de α-KG y aumenta la dimetilación tanto en H3K9 como en H3K79. Además, (R)-2-Hydroxyglutarate inhibe la ATP sintasa y la señalización mTOR, y por lo tanto causa la detención del crecimiento y la muerte de células tumorales.
Ensayo de quinasa
Ensayos enzimáticos
Para ensayar la actividad desmetilasa humana JHDM1A/KDM2A hacia H3K36me2, la JHDM1A con etiqueta His se obtiene primero transformando pET28a-JHDM1A en Escherichia coli BL21 y la expresión de proteínas se induce mediante la adición de 1 mM de IPTG a 30 °C cuando la densidad celular alcanza 0,5 unidades OD600. Las células se lisan por sonicación y se utiliza agarosa Ni-NTA para purificar las proteínas de fusión His-JHDM1A. El ensayo de desmetilación de histonas se lleva a cabo incubando 2 μg de oligonucleosomas, 4 μg de His-JHDM1A purificada y/o 10–50 mM de L- o D-2-HG en tampón de desmetilación de histonas [50 mM HEPES (pH 8,0), 625 μM Fe(NH4)2(SO4)2, 0,1–0,5 mM α-KG, 2 mM ascorbato] a 37 °C durante 2–3 h y las reacciones se detienen mediante la adición de tampón de carga SDS y posteriormente se analizan por Western Blotting utilizando un anticuerpo anti-H3K36me2. Para medir la actividad desmetilasa de CeKDM7A hacia H3K9me2 y H3K27me2, se utilizan dos péptidos dimetilados sintéticos H3K9me2 [ARTKQTARK (me2)STGGKA] y H3K27me2 [QLATKAARK (me2)SAPAS] como sustratos. Los ensayos de desmetilación se llevan a cabo en presencia de 10 μg de enzima, 1 μg de péptido en 20 μl de tampón 20 mM Tris-HCl (pH 7,5), 150 mM NaCl, 50 μM Fe(NH4)2(SO4)2, 100 μM α-KG, 2 mM Vc, 10 mM PMSF durante 3 h. La mezcla de reacción de desmetilación se desala pasándola a través de una C18 ZipTip. Para examinar el efecto inhibidor de 2-HG, varias concentraciones de 2-HG se incuban con KDM7A brevemente antes de añadir otras mezclas de reacción. Las muestras se analizan mediante un espectrómetro de masas MALDI-TOF/TOF.
Referencias