solo para uso en investigación

Bafilomycin A1 (Baf-A1) inhibidor de V-ATPase

Cat. No.S1413

Bafilomycin A1 (Baf-A1) es un inhibidor de la H+-ATPase vacuolar con una IC50 de 0,44 nM, y se ha encontrado que inhibe la autophagy mientras induce la apoptosis.
Bafilomycin A1 (Baf-A1) Proton Pump Inhibidor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 622.83

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: Pureza: >97%
97

Productos que se suelen utilizar junto con Bafilomycin A1 (Baf-A1)

3-Methyladenine (3-MA)

It and 3-Methyladenine (3-MA) combination plus irradiation leads to more pronounced and prolonged DNA damage in glioma and breast cancer cells.

Y-27632 Dihydrochloride

Explore the signalling pathways involved in ARV S1133 regulated switch from autophagy to apoptosis.

Torin 1

Explore TGFBI metabolism and autophagy impairment in TBCD corneal fibroblasts using it.

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Líneas celulares Tipo de ensayo Concentración Tiempo de incubación Formulación Descripción de la actividad PMID
human H4 cells Function assay 0.4 μM 24 h Induction of light chain 3-GFP level in human H4 cells at 0.4 uM after 24 hrs by high throughput fluorescence microscopy relative to control 18024584
RAW 264.7 cells Function assay 100 nM Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as increased nitric oxide production in infected cells at 100 nM 19307359
mouse RAW264.7 cells Apoptosis assay 100 nM 16 h Induction of apoptosis in mouse RAW264.7 cells assessed as late apoptotic cells at 100 nM after 16 hrs using annexin V-propidium iodide staining by flow cytometry 19307359
human HeLa cells Function assay 400 nM Induction of autophagy in human HeLa cells expressing EGFP-LC3 assessed as increase in LC3-2 level at 400 nM 18391949
human MCF7 cells Function assay 4 h Inhibition of rapamycin-induced autophagy in human MCF7 cells expressing EGFP-LC3 assessed as decrease in EGFP levels at 100 nM after 4 hrs by Western blotting relative to control 20028134
RAW 264.7 cells Bactericidal activity assay 100 nM 16 h Bactericidal activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as decrease in bacterial growth yield at 100 nM after 16 hrs postinfection by flow cytometry in presence of 10 ug/ml of intracellular replication inhi 19307359
RAW 264.7 cells Antimicrobial activity assay 100 nM Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as increased nitric oxide production in infected cells at 100 nM 19307359
RAW 264.7 cells Antimicrobial activity assay 100 nM 30 mins Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as inhibition of bacterial replication at 100 nM treated 30 mins before infection measured after 2 to 16 hrs postinfection by flow cytometry 19307359
rat 3Y1 cells Function assay Induction of morphological changes in rat 3Y1 cells assessed as elongation of cells 29701963
human Huh7.5.1 cells Antiviral activity 3 h Antiviral activity against HCV genotype 2a JFH-1 in human Huh7.5.1 cells assessed as reduction of viral entry up to 3 hrs by luciferase assay 26396683
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Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 622.83 Fórmula

C35H58O9

Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 88899-55-2 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos N/A Smiles CC1CC(=CC=CC(C(OC(=O)C(=CC(=CC(C1O)C)C)OC)C(C)C(C(C)C2(CC(C(C(O2)C(C)C)C)O)O)O)OC)C

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
H+-ATPase
(Cell-free assay)
0.44 nM
In vitro
Bafilomycin A1 (Baf-A1) es un antibiótico macrólido tóxico derivado de Streptomyces griseus, que inhibe la corriente de cortocircuito inducida por el epitelio del manto exterior (OME). La IC50 y la dosis máxima de inhibición de este compuesto son 0,17 μM y 0,5 μM, respectivamente. Además, inhibe el influjo ácido con un valor de IC50 de 0,4 nM. También inhibe la acidificación de manera dependiente de la dosis, lo que resulta en un menor apagamiento y, por lo tanto, una mayor fluorescencia. Este compuesto previene la vacuolización de las células Hela inducida por H. pylori, con una concentración inhibitoria que produce el 50% de la máxima (ID50) de 4 nM, y es muy eficiente en la restauración de las células vacuoladas a una apariencia normal. También afecta el transporte de material endocitado desde los compartimentos endocíticos tempranos a los tardíos, no solo disipando el pH endosomal bajo sino también bloqueando el transporte de endosomas tempranos a tardíos en las células HeLa. A dosis de 0,1-1 μM, inhibe completamente la acidificación de los lisosomas revelada por la incubación con naranja de acridina en las células BNL CL.2 y A431. Cuando se añade a la solución salina equilibrada de Hanks, la degradación de proteínas endógenas se inhibe fuertemente y se acumulan numerosos autofagosomas en las células H-4-II-E. También previene la aparición de HRP endocitada en las vacuolas autofágicas.
Ensayo de quinasa
Ensayos de actividad enzimática de ATPase
El medio del ensayo enzimático de ATPasa contiene 6 mM de MgSO4, 50 mM de HEPES (pH 7.4), 200 mM de Na2SO3 (activador de V-ATPase), 0.5 mM de orto-vanadato de sodio (inhibidor de P-ATPase), 0.5 mM de azida de sodio (inhibidor de F-ATPase) y 3 mM de Na2ATP. Este medio (1.0 mL), con o sin la adición del inhibidor de ATPasa tipo V Bafilomycin A1 (Baf-A1), se incuba con el homogeneizado filtrado (0.1 mL) durante 60 minutos a 23–25 °C. La reacción se detiene con la adición de 1 mL de TCA al 3%. Los blancos espectrométricos se preparan como para el ensayo enzimático, con la excepción de que la muestra de tejido se añade después del ácido. El análisis de fosfato se realiza añadiendo 2 mL de 1-butanol y 0.2 mL de solución de molibdato (5 g de molibdato de amonio, 22 mL de H2SO4 hasta 100 mL). Después de vortexear durante 15 segundos, la solución se neutraliza con 0.5 mL de solución de citrato (100 g/500 mL, pH 7.0) y se vuelve a vortexear durante 15 segundos. Luego, la solución se centrifuga (2000 × g; 3 minutos) para separar la fase de butanol y la absorbancia de esta fase se lee a 400 nm. Se preparan estándares de ortofosfato (0.1 μM–2.0 μM) y se tratan de la misma manera que los ensayos de actividad enzimática. La actividad enzimática se expresa en μmol de ortofosfato liberado por hora y por miligramo de proteína. La actividad de V-ATPase se considera la diferencia entre la actividad ATPasa total medida en presencia de Na2SO3, ortovanadato de sodio y azida de sodio y la actividad ATPasa medida en presencia de estos reactivos y de este compuesto.
In vivo
Bafilomycin A1 (Baf-A1) (1 μM y 0,1 μM) inhibe completamente la actividad resorptiva de los osteoclastos cultivados. Este compuesto inhibe de forma dosis-dependiente la tasa de absorción de Na+ en tilapias jóvenes con una Ki de 0,16 μM.
Referencias
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8446034/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9811698/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1832676/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9639028/
  • [8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7817803/
  • [9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10574743/
  • [10] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14713959/

Aplicaciones (Applications)

Métodos Biomarcadores Imágenes PMID
Western blot Ret / EGFR / p75 NGFR
S1413-WB1
21559479
Growth inhibition assay Cell viability
S1413-viability1
20534000
Immunofluorescence AIF LC3
S1413-IF1
25512644
ELISA TNF-alpha
S1413-ELISA1
26240140

Preguntas frecuentes (Frequently Asked Questions)

Pregunta 1:
How to dissolve it?

Respuesta:
S1413 is soluble in DMSO at 6 mg/ml. Please do not use alcohols as solvent, because this compound will degrade in alcohols.