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VX-809 (Lumacaftor) CFTR modulator

Cat. No.: S1565

Lumacaftor (VX-809, VRT 826809) acts to correct CFTR mutations common in cystic fibrosis by increasing mutant CFTR (F508del-CFTR) maturation,EC50 of 0.1 μM in fisher rat thyroid cells. Phase 3.
VX-809 (Lumacaftor) CFTR modulator Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 452.41

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: Pureza: 99.87%
99.87

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Líneas celulares Tipo de ensayo Concentración Tiempo de incubación Formulación Descripción de la actividad PMID
CFBE41o Corrector assay 24 hrs Corrector activity at CFTR F508-del mutant (unknown origin) expressed in human CFBE41o cells harboring HS-YFP preincubated for 24 hrs followed by forskolin/genistein stimulation for 30 mins by fluorescence assay, EC50 = 2.5704 μM. 29272749
FRT Corrector assay 25 mins Corrector activity at human CFTR F508 deletion mutant expressed in FRT cells incubated for 25 mins with forskolin by YFP-based fluorescence analysis relative to control, EC50 = 2.6 μM. 26561003
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-12 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
fibroblast cells qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for control Hh wild type fibroblast cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh30 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for U-2 OS cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh41 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for RD cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
CFBE41o Corrector assay 1 uM 24 hrs Corrector activity at CFTR F508-del mutant (unknown origin) expressed in human CFBE41o cells harboring HS-YFP assessed as increase in matured protein levels at cell surface at 1 uM after 24 hrs by electrophoretic mobility assay 29272749
HBE Corrector assay Corrector activity at CFTR F508del/F508del mutant in primary HBE cells assessed as increase in chloride ion current across apical membrane measured 18 to 24 hrs post compound treatment on basolateral side of cells in presence of channel potentiator GLPG18 29251932
CFBE41o Corrector assay Corrector activity at CFTR F508del mutant (unknown origin) expressed in human CFBE41o cells assessed as increase in fully glycosylated protein by western blot analysis 26041577
CFBE41o Corrector assay 1 uM 24 hrs Corrector activity at CFTR F508del mutant (unknown origin) expressed in human CFBE41o cells assessed as increase in size of cAMP-dependent current at 1 uM after 24 hrs measured at +100 mV by whole cell patch clamp assay 26041577
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Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 452.41 Fórmula

C24H18F2N2O5

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 936727-05-8 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos VRT 826809 Smiles CC1=C(N=C(C=C1)NC(=O)C2(CC2)C3=CC4=C(C=C3)OC(O4)(F)F)C5=CC(=CC=C5)C(=O)O

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

DMSO : 90 mg/mL (198.93 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 13 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Características
Higher specificity and efficacy relative to other CFTR defect drugs.
Targets/IC50/Ki
F508del-CFTR
(Fisher rat thyroid cells)
0.1 μM(EC50)
In vitro

Lumacaftor (VX-809) actúa a nivel del RE para permitir que una fracción del F508del-CFTR adopte una forma correctamente plegada, salga del RE y se movilice hacia la superficie celular para un funcionamiento normal. En células tiroideas de rata Fischer (FRT) que expresan F508del-CFTR, el tratamiento con este compuesto mejora significativamente la maduración del F508del-CFTR en 7,1 veces con una EC50 de 0,1 μM, y mejora el transporte de cloruro mediado por F508del-CFTR en aproximadamente 5 veces con una EC50 de 0,5 μM, mientras que VRT-768 tiene valores de EC50 más altos de 7,9 μM y 16 μM, respectivamente. En células HEK-293 que expresan F508del-CFTR, (3 μM) aumenta la salida de F508del-CFTR del RE en 6 veces, alcanzando niveles comparables al 34% de CFTR. En células epiteliales bronquiales humanas primarias (HBE) con mutación F508del-CFTR, el agente aumenta la maduración de CFTR y mejora la secreción de cloruro con EC50 de 350 nM y 81 nM, respectivamente, siendo más eficaz que Corr-4a y VRT-325. El F508del-CFTR corregido por él exhibe una probabilidad de apertura de canal único de 0,39 similar al CFTR normal de 0,40. A diferencia de VX-770, no es un potenciador de CFTR, ya que la adición aguda no tiene efecto sobre la función de F508del-CFTR. A diferencia de VRT-325 y Corr-4a, no mejora el procesamiento de las formas normales o mutantes de hERG o P-gp, así como de otras proteínas mal localizadas causantes de enfermedades, incluyendo el mutante α1-antitripsina Z (E342K-α1-AT) o N370S-β-glucosidasa, lo que sugiere que es específico para CFTR. En combinación con VRT-325 o Corr-4a tiene un efecto aditivo sobre el transporte de cloruro mediado por CFTR en células F508del-HBE cultivadas.

Ensayo de quinasa
maduración del F508del-CFTR
Las células FRT que expresan de forma estable F508del-CFTR se tratan con concentraciones crecientes de Lumacaftor (VX-809) durante 48 horas. Después de la incubación, las células se recolectan en solución D-PBS fría (sin calcio ni magnesio) y se centrifugan a 1.000 × g a 4 °C. Los pellets celulares se lisan en 1% de Nonidet P-40, 0,5% de desoxicolato de sodio, 200 mM de NaCl, 10 mM de Tris, pH 7,8, y 1 mM de EDTA más una mezcla de inhibidores de proteasas (1:250) durante 30 minutos en hielo. Los lisados se centrifugan durante 10 minutos a 10.000 × g a 4 °C para sedimentar los núcleos y el material insoluble. Aproximadamente 12 μg de proteína total se calientan en tampón de Laemmli con 5% de β-mercaptoetanol a 37 °C durante 5 minutos y se cargan en un gel de Tris-acetato del 3% al 8%. El gel se transfiere a nitrocelulosa y se procesa para Western blotting utilizando un anticuerpo monoclonal CFTR o policlonal contra GAPDH. Las membranas se revelan mediante quimioluminiscencia mejorada. La cuantificación de las cantidades relativas de las bandas C y GAPDH se realiza utilizando el análisis NIH ImageJ de las películas escaneadas.
In vivo

Lumacaftor (VX-809; VRT 826809) es un modulador de CFTR que corrige el plegamiento y el tráfico de la proteína CFTR.
Referencias

Aplicaciones (Applications)

Métodos Biomarcadores Imágenes PMID
Immunofluorescence CFTR / USP13 Cell surface kAE1 / kAE1
S1565-IF1
30618756

Información del ensayo clínico (Clinical Trial Information)

(datos de https://clinicaltrials.gov, actualizado el 2024-05-22)

Número NCT Reclutamiento Condiciones Patrocinador/Colaboradores Fecha de inicio Fases
NCT03512119 Completed
Cystic Fibrosis Homozygous for Phe 508 Del CFTR|Glucose Intolerance or Newly Diagnosis Diabetes
University Hospital Strasbourg France
 February 11 2016 --
NCT02589236 Completed
Cystic Fibrosis
Nivalis Therapeutics Inc.|Medidata Solutions
 November 2015 Phase 2
NCT02514473 Completed
Cystic Fibrosis
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
 July 2015 Phase 3
NCT01899105 Completed
Cystic Fibrosis
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
 July 2013 Phase 1