GSK650394

Catalogusnr.S7209 Batch:S720901

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C25H22N2O2
Molecuulgewicht 382.45 CAS-nr. 890842-28-1
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 76 mg/mL (198.71 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving GSK650394 is een serum- en glucocorticoïd-gereguleerde kinase-1-remmer met een IC50 van respectievelijk 62 nM en 103 nM voor SGK1 en SGK2.
Doelen
SGK1
(Cell-free assay)		 SGK2
(Cell-free assay)
62 nM 103 nM
In vitro GSK650394 remt SGK1-gemedieerd epitheliaal transport met een IC50 van 0,6 μM in de SCC-assay. In LNCaP-cellen remt deze verbinding de androgeen-gemedieerde verbetering van Nedd4-2-fosforylering en androgeen-gemedieerde celgroei. Deze chemische stof gaat de Cortisol-geïnduceerde afname van neurogenese, veranderingen in Hedgehog-signalering en GR nucleaire translocatie tegen. [2] Het remt de replicatie van het influenzavirus door de export van influenza vRNP's naar het cytoplasma van A549-cellen te belemmeren.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Scintillatie nabijheidsanalyse (SPA)

    SGK1 S422D (60–431 aa; 0,275 μg/mL eindconcentratie) of SGK2 (0,875 μg/mL eindconcentratie) worden geactiveerd door PDK1 (1,1 μg/mL eindconcentratie) in een buffer bestaande uit 50 mM Tris (pH 7.5), 0,1 mM EGTA, 0,1 mM EDTA, 10 mM MgCl2, 0,1% β-mercaptoethanol, 1 mg/mL BSA, en ATP (eindconcentratie van 0,15 mM) en gedurende 30 min geïncubeerd bij 30°C. SGK2 wordt exact bereid zoals beschreven voor SGK1, behalve dat het overeenkwam met het full-length eiwit. Een oplossing met gebiotinyleerd CROSStide peptide in een eindconcentratie van 75 μM en γ32P-ATP overeenkomend met 2×106 cpm wordt bereid in de reactiebuffer. In een 96-well plaat wordt 5 μL van deze verbinding toegevoegd aan 25 μL van het geactiveerde enzymmengsel. Hieraan wordt 20 μL van het CROSStide mengsel toegevoegd en gedurende 1 uur geïncubeerd bij kamertemperatuur. Vervolgens wordt 50 μL van een 25 mg/mL suspensie van streptavidine-gecoate SPA-parels in PBS met 0,1 M EDTA, pH 8.0 toegevoegd. De plaat wordt vervolgens verzegeld en gedurende 8 min gecentrifugeerd bij 2000 rpm, en het signaal wordt gedetecteerd door gedurende 30 sec/well te meten in een Packard TopCount NXT Scintillation Counter. De IC50-waarden van de remming van SGK1 en SGK2-activiteiten door deze chemische stof worden uit deze gegevens berekend met behulp van GraphPad Prism 3 Software.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    LNCaP cells

  • Concentraties

    ~10 μM

  • Incubatietijd

    7 days

  • Methode

    LNCaP cells are plated at a density of 5,000 cells per well in 96-well plates in 100 μL PRF-RPMI 1640, supplemented with 8% CS-FBS, 0.1 mM NEAA, and 1 mM NaPyr. At day three, cells are treated with hormone with or without GSK650394 by removing 50 μL of the media and replacing this with 50 μL of PRF-RPMI 1640 with 8% CS-FBS, NEAA, NaPyr containing a 2X concentration of the appropriate hormone/this compound treatment. At days 5 and 7, the treatment is repeated. On the tenth day, the media is removed and the relative cell number is measured using the FluoReporter Blue assay according to the manufacturer’s instructions.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18794135/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23650397/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23487453/

Klantproductvalidatie

BV-2 cells were incubated in the absence or presence of gsk650394 (1 μM) for 30 min, followed by LPS (500 ng/ml) administration for 30 min, and then fixed. NF-κB p65 protein was visualized by indirect immunofluorescence staining using an antibody for NF-κB p65. For nuclear staining, the cells were stained with DAPI. Bar = 20 μm.

Gegevens van [ , , Biochem Biophys Res Commun, 2016, 478(1):53-59 ]

GSK650394 treatment reduces steady state levels of BoHV-1 proteins. Cells were grown prior to infection. Three hours prior to infection 25 nM of GSK650394 was added to the designated cultures. CRIB cells were infected withBoHV-1 (moi=2) and then stripped FBS added. At the designated times after infection (hours), whole cell lysate (50 ug protein) was prepared and Western Blots performedusing the designated antibodies directed against a viral protein. Arrows denote the position of bICP0 (97 kD), bICP4 (178 kD), bICP22 (45 kD), VP16 (65 kD), and the bracketdenotes various gE forms. Tubulin was used as a loading control. The lane marked M are molecular weight markers: numbers to left are the approximate size of the respectivebands. These results are representative of 4 independent experiments. The relative levels of the respective BoHV-1 proteins were estimated by comparing the intensity ofthe bands to tubulin using a BioRad ChemiDoc MP and PMI System. The value of the respective viral protein that was first detected after infection was set at 10 and the othervalues normalized to this value. ND refers to those lanes in which the viral protein was not detected. These results are representative of three independent experiments.

Gegevens van [ , , Virus Res, 2016, 222:106-112. ]

Sellecks GSK650394 Is geciteerd door 24 Publicaties

Patient-derived enteroids provide a platform for the development of therapeutic approaches in microvillus inclusion disease [ J Clin Invest, 2023, 133(20)e169234] PubMed: 37643022
Bacterial DNA promoting inflammation via the Sgk1/Nedd4L/Syk pathway in mast cells contributes to antihistamine non-responsive CSU [ J Leukoc Biol, 2023, qiad025] PubMed: 36857592
Estrogen-sensitive activation of SGK1 induces M2 macrophages with anti-inflammatory properties and a Th2 response at the maternal-fetal interface [ Reprod Biol Endocrinol, 2023, 21(1):50] PubMed: 37226177
Inhibition of SGK1 potentiates the anticancer activity of PI3K inhibitor in NSCLC cells through modulation of mTORC1, p‑ERK and β‑catenin signaling [ Biomed Rep, 2023, 19(6):94] PubMed: 37901878
Therapy Development for Microvillus Inclusion Disease using Patient-derived Enteroids [ bioRxiv, 2023, 2023.01.28.526036] PubMed: 36747680
Activation of Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 1/Nuclear Factor-κB Pathway Are Correlated with Low Sensitivity to Bortezomib and Ixazomib in Resistant Multiple Myeloma Cells [ Biomedicines, 2021, 9(1)E33] PubMed: 33406639
Identification and Kinetic Characterization of Serum- and Glucocorticoid-Regulated Kinase Inhibitors Using a Fluorescence Polarization-Based Assay [ SLAS Discov, 2021, 24725552211002465] PubMed: 33783250
Crosstalk between Hedgehog pathway and the glucocorticoid receptor pathway as a basis for combination therapy in T-cell acute lymphoblastic leukemia [ Oncogene, 2020, 10.1038/s41388-020-01453-2] PubMed: 32917954
Convergent genomic and pharmacological evidence of PI3K/GSK3 signaling alterations in neurons from schizophrenia patients [ Neuropsychopharmacology, 2020, 10.1038/s41386-020-00924-0] PubMed: 33288841
Targeting histone K4 trimethylation for treatment of cognitive and synaptic deficits in mouse models of Alzheimer's disease [ Sci Adv, 2020, 6(50)eabc8096] PubMed: 33298440

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.