Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC)

Catalogusnr.S6928 Batch:S692801

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C21H11NO5S
Molecuulgewicht 389.38 CAS-nr. 3326-32-7
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 78 mg/mL (200.31 mM)
Ethanol 10 mg/mL (25.68 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Fluoresceïne-5-isothiocyanaat (FITC, Fluoresceïne-isothiocyanaatisomeer I, 5-FITC) is een fluorescerende sonde die kan worden geconjugeerd aan weefsel en eiwitten.
In vitro

1.Eiwitvoorbereiding
1) Om het beste labelingsresultaat te verkrijgen, gelieve de eiwit (antilichaam) concentratie van 2 mg/mL te bereiden.
2) De pH-waarde van de eiwitoplossing moet 8,5±0,5 zijn. Indien de pH lager is dan 8,0, moet 1M natriumbicarbonaat worden gebruikt voor aanpassing.
3) Indien de eiwitconcentratie lager is dan 2 mg/mL, zal de labeleringsefficiëntie sterk verminderd zijn. Om de beste labeleringsefficiëntie te verkrijgen, wordt aanbevolen dat het uiteindelijke eiwitconcentratiebereik 2-10 mg/mL is.
4) Het eiwit moet zich in een buffer bevinden zonder primaire amine (zoals Tris of glycine) en ammoniumionen, anders zal de labeleringsefficiëntie worden beïnvloed.
2.Dye Preparation
Voeg watervrij DMSO toe aan de flacon met Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) om een 10 mM stockoplossing te maken. Meng goed door te pipetteren of te vortexen.
3.Berekening van de kleurstofdosering
De hoeveelheid van deze verbinding die nodig is voor de reactie hangt af van de hoeveelheid te labelen eiwit, en de optimale molaire verhouding ervan tot eiwit is ongeveer 10.
Voorbeeld: stel dat het vereiste markeringsproteïne 1 mL 2 mg/mL IgG (MW=150.000) is, gebruik 1 mL DMSO om 1 mg FITC op te lossen, het benodigde volume is 40 μL.
4.Uitvoeren van conjugatiereactie
1) Een goed volume vers bereide 10 mg/mL FITC wordt langzaam toegevoegd aan 0,5 mL eiwitmonster. Schud zachtjes in oplossing om te mengen en centrifugeer vervolgens kort om het monster onderaan de reactiebuis te verzamelen. Niet grondig mengen om denaturatie en inactivatie van eiwitmonsters te voorkomen.
2) De reactiebuisjes werden op een donkere plaats geplaatst en gedurende 60 minuten met tussenpozen zachtjes bij kamertemperatuur geïncubeerd. Draai de reactiebuisjes gedurende 10-15 minuten zachtjes meerdere keren om de twee reactanten volledig te mengen en de efficiëntie te verhogen.
5.Zuivering van de conjugatie
Het volgende protocol is een voorbeeld van kleurstof-eiwitconjugaatzuivering met behulp van een Sephadex G-25 kolom.
1) Bereid de Sephadex G-25 kolom voor volgens de instructies van de fabrikant.
2) Breng het reactiemengsel (van ""Run conjugation reaction"") aan op de bovenkant van de Sephadex G-25 kolom.
3) Voeg PBS (pH 7.2-7.4) toe zodra het monster net onder het bovenste harsoppervlak loopt.
4) Voeg meer PBS (pH 7.2-7.4) toe aan het gewenste monster om de kolomzuivering te voltooien.
Combineer de fracties die het gewenste kleurstof-eiwitconjugaat bevatten.

Protocol (uit referentie)

Sellecks Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Is geciteerd door 1 Publicatie

Circular RNA circ-MMP11 Contributes to Lapatinib Resistance of Breast Cancer Cells by Regulating the miR-153-3p/ANLN Axis [ Front Oncol, 2021, 11:639961] PubMed: 34295807

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.