In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Org 27569 is een allosterische modulator van de cannabinoid CB1 receptor, die een CB1 receptorstatus induceert die gekenmerkt wordt door een verhoogde agonistaffiniteit en een verlaagde inverse agonistaffiniteit.
Doelen
CB1
In vitro
Org 27569 is een allosterische modulator van de CB1 cannabinoid receptor. Het verhoogt significant de binding van de CB1 receptor agonist en veroorzaakt een significante afname van de specifieke binding van de CB1 receptor inverse agonist. Deze verbinding induceert CB1 hoge affiniteit agonistbinding, receptorinternalisatie en stroomafwaartse ERK-fosforylatie. De allosterische ligand bevordert agonistbinding aan CB1, maar blokkeert de agonist-geïnduceerde conformationele veranderingen in TM6. Het vangt de receptor in een onderscheidende agonist-gebonden, maar niet-signalerende conformationele toestand.
Functies
Vangt de receptor in een onderscheidende agonist-gebonden, maar niet-signalerende conformationele toestand.
Bindingsassays worden uitgevoerd met de CB1 receptoragonist [3H]CP 55,940 (0,7 nM) en de CB1 receptorantagonist [3H]SR 141716A (1,2 nM), 1 mg/ml BSA en 50 mM Tris-buffer met 0,1 mM EDTA en 0,5 mM MgCl2, pH 7,4, in een totaal assayvolume van 500 μl. Binding wordt geïnitieerd door de toevoeging van muizenhersenmembranen (30 μg). Assays worden gedurende 60 minuten bij 37°C uitgevoerd voordat ze worden beëindigd door toevoeging van ijskoude wasbuffer (50 mM Tris-buffer en 1 mg/ml BSA) en vacuümfiltratie met behulp van een 24-wells bemonsteringseenheid en Whatman GF/B glasvezelfilters die gedurende 24 uur bij 4°C in wasbuffer zijn geweekt. Elke reactiebuis wordt vijf keer gewassen met een 4 ml aliquot buffer. De filters worden 60 minuten in de oven gedroogd en vervolgens in 5 ml scintillatievloeistof geplaatst, en radioactiviteit wordt gekwantificeerd door vloeistofscintillatiespectrometrie. Specifieke binding wordt gedefinieerd als het verschil tussen de binding die optrad in aanwezigheid en afwezigheid van 1 μM concentraties van de corresponderende ongelabelde ligand en bedraagt 70 tot 80% van de totale binding.
Cells expressing CB1 receptors are exposed to ORG27569 (10 μM) for 5 to 15 min. For toxin treatment to abrogate Gi coupling effects, PTX is added to the medium at 5 ng/ml. Following an 18-h incubation in the presence of toxin, cells are washed twice with PBS and treated with compounds. Cells are washed with ice-cold PBS, and cell lysates are obtained by harvesting the cells with ice-cold lysis buffer (150 mM NaCl, 1.0% IGEPAL CA-630, 0.5% sodium deoxycholate, 0.1% SDS, and 50 mM Tris, pH 7.5 containing 4-(2-aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride, pepstatin A, E-64, bestatin, leupeptin, and aprotinin as protease inhibitors).
Referenties
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16113085/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22343625/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22846992/
Sellecks Org 27569 Is geciteerd door 2 Publicaties
GPCR kinase subtype requirements for arrestin-2 and -3 translocation to the cannabinoid CB1 receptor and the consequences on G protein signalling
[ Biochem Pharmacol, 2024, 224:116190]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
