Name: GSK2334470
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7087
Rating: 5 (29 reviews)

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Contrôle qualité

Lot : Pureté : 99.96%

99.96

Cibles apparentées	PI3K Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PTEN PP2A PDK
Autre PDPK1 Inhibiteurs	OSU-03012 (AR-12) PS-48 BX517 Indoprofen PS210 PS47

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires	Type dessai	Description de lactivité	PMID
PC3 cells	Function assay	Inhibition of PDK1-mediated AKT phosphorylation at Thr308 residue in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.113 μM	21341675
PC3 cells	Function assay	Inhibition of PDK1-mediated RSK phosphorylation at Ser221 residue in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.293 μM	21341675
K562 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human K562 cells, IC50=18 μM	21341675
OCI-AML2 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human OCI-AML2 cells, IC50=0.35 μM	21341675
OCI-AML3 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human OCI-AML3 cells, IC50=0.52 μM	21341675
F-36P cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human F-36P cells, IC50=0.28 μM	21341675
insect cells	Function assay	Inhibition of recombinant full length PDK1 (unknown origin) expressed in insect cells assessed as inhibition of Akt activation measured for 30 mins in presence of [gamma32P-ATP], IC50=0.01 μM	23448267
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire	462.59	Formule	C₂₅H₃₄N₈O	Stockage (À partir de la date de réception)	3 ans-20°Cpoudre
N° CAS	1227911-45-6	Télécharger le SDF		Stockage des solutions mères	1 an-80°Cen solvant 1 mois-20°Cen solvant
Synonymes	N/A			Smiles	CC1CCC(CN1C2=NC(=NC(=C2)C3=CC4=C(C=C3)C(=NN4)N)NC)C(=O)NC5CCCCC5

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 93 mg/mL (201.04 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 93 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse	Concentration	Volume	Poids moléculaire
=	×	×

Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo Lot:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe de vente pour des tests personnalisés.	4.650mg/ml (10.05mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 93 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Entrez les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

Dosage : mg/kg Poids moyen des animaux : g Volume de dosage par animal :μL Nombre danimaux :

Étape 2 : Entrez la formulation in vivo (Ceci nest que le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuiteμL PEG300, mélanger et clarifier, ajouter ensuiteμL Tween 80, mélanger et clarifier, ajouter ensuite μL ddH₂O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuite μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Remarque : 1. Assurez-vous que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue lors de lajout précédent est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC₅₀/Ki	PDPK1 (Cell-free assay) 10 nM
In vitro	GSK2334470 inhibe PDK1 en activant Akt1 pleine longueur en présence de vésicules lipidiques contenant du PtdIns(3,4,5)P₃ ou un mutant d'Akt1 dépourvu du domaine PH (ΔPH-Akt1) avec une IC50 d'environ 10 nM. Ce composé inhibe également de manière similaire PDK1 en phosphorylating le substrat peptidique PDKtide avec une IC50 d'environ 10 nM. Il (0,1 μM –0,3 μM) induit une inhibition significative et dose-dépendante de NDRG1 endogène avec une réduction de plus de 50% de la phosphorylation dans les cellules HEK-293. Ce produit chimique (30 nM) induit une inhibition significative et dose-dépendante de la phosphorylation de la boucle T de chaque isoforme de SGK dans les cellules HEK-293. Il (1 μM) inhibe la phosphorylation du motif hydrophobe de S6K1 dans une mesure similaire à la phosphorylation de la boucle T dans les cellules HEK-293. Ce composé (3 μM) supprime également l'activité et la phosphorylation de S6K1 induites par la stimulation d'IGF1 sur les cellules HEK-293 privées de sérum. Il (3 μM) inhibe de manière significative la phosphorylation de plusieurs substrats d'Akt [FoxO (forkhead box O), GSK3 et PRAS40]. Ce produit chimique (3 μM) induit également une inhibition quasi maximale de l'activité et de la phosphorylation d'Akt1 en 5 min, et la phosphorylation des substrats d'Akt (FoxO, GSK3 et PRAS40) est inhibée à un point temporel légèrement ultérieur (10 min). Il (0,3 μM) inhibe significativement la phosphorylation d'Akt ou de PRAS40/GSK3 dans les cellules ES knock-in PDK1K^465E/K465E mais pas dans les cellules ES de type sauvage. Ce composé (1 μM) supprime efficacement l'activité de SGK1, comme en témoigne l'inhibition de la phosphorylation de NDRG1 dans les cellules de glioblastome U87. Il (1 μM) supprime également puissamment l'activation de S6K1 (Figure 7B) ainsi que de SGK1 dans les cellules MEF (fibroblastes embryonnaires de souris). Ce produit chimique (0,1 μM) induit environ 50% d'inhibition de l'activité de RSK2 dans les cellules HEK-293. Il (30 µM) supprime la force sensibilisée au Ca²⁺ induite par l'U46619 dans les artères pulmonaires de lapin perméabilisées à l'α-toxine. Ce composé (30 µM) entraîne une diminution significative de la force contractile en réponse au [Ca²⁺]. Il (1 μM) entraîne une abolition totale de l'augmentation du calcium intracellulaire induite par l'EGF et de l'accumulation d'inositol phosphates dans les cellules MDA-MB-231. Ce produit chimique (1 μM) inhibe la phosphorylation de PLCγ1 Tyr783 dans les cellules MDA-MB-231.
Kinase Assay	Essais d'activité kinase
Kinase Assay	Akt, S6K et RSK endogènes sont immunoprécipités à partir de 0,1 mg à 1 mg de lysat cellulaire pendant 2 heures à 4 ℃ sur une plateforme vibrante à l'aide de 3 μg –5 μg des anticorps indiqués. Pour les essais d'activité SGK, 150 μg de lysat transfecté sont incubés avec 5 μg de glutathion –Sépharose pendant 3 heures à 4 ℃. Les immunoprécipités sont lavés deux fois avec un tampon de lyse contenant 0,5 mM NaCl, suivis de deux lavages avec un tampon kinase. Les réactions kinases sont initiées par un mélange réactionnel pour amener les concentrations finales des composants de la réaction à 0,1 mM [ γ - ³²P]ATP (~200 c.p.m./pmol), 5 mM acétate de magnésium, 0,1% 2-mercaptoéthanol et 30 mM peptide Crosstide (GRPRTSSFAEGKK). Les réactions sont effectuées pendant 20 min à 30 ℃ sur une plateforme vibrante et arrêtées en déposant les réactions sur du papier phosphocellulose P81. Le comptage Cerenkov est effectué après avoir lavé les papiers dans de l'acide phosphorique, rincé dans de l'acétone et séché à l'air. Une unité d'activité est définie comme celle qui a catalysé l'incorporation de 1 nmol de [ ³²P]phosphate dans le substrat sur 1 heure.
In vivo	Ce composé est un inhibiteur très spécifique et puissant de PDK1.
Références	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21087210/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23516539/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22454520/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24037523/

Applications

Méthodes	Biomarqueurs	Images	PMID
Western blot	p-Myc / Myc / p-p70 / p70 pRb / pPDK1 / pAKT / pRSK2 / p70S6K / pPRAS40 / pS6		25762617
Immunofluorescence	KDM4A / Pol-I		26729372

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si vous avez dautres questions, veuillez laisser un message.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

GSK2334470 PDPK1 inhibiteur

Structure chimique

Poids moléculaire: 462.59